基于环介导等温扩增技术建立的假丝酵母菌快速检测方法

发布时间：2018-01-07 21:33

  本文关键词：基于环介导等温扩增技术建立的假丝酵母菌快速检测方法　出处：《中国现代医学杂志》2016年24期 　论文类型：期刊论文

  更多相关文章： 假丝酵母菌 环介导等温扩增 检测方法

【摘要】：目的基于环介导等温扩增技术(LAMP)建立一种假丝酵母菌的快速检测方法。方法依据假丝酵母属18 S r DNA基因保守序列,采用Primer Explorer V4软件设计引物,建立LAMP扩增方法和反应体系,对体系的4种关键参数和3项性能指标进行优化和探讨,并用临床样本进行方法验证。结果 6种常见假丝酵母菌LAMP法检测均为阳性;最适扩增条件为:温度63~65℃、Bst酶活性4 IU、Mg2+浓度4 mol/L、扩增时间1 h;7种对照菌种及人全血DNA样本LAMP扩增结果均为阴性;检测限为102~107CFU/ml。经52例临床样本验证,该法敏感性为100%,特异性为95%。结论该研究建立的LAMP假丝酵母菌检测方法具有实用、简便、快速、特异和敏感的特点,可为临床提供一种新的假丝酵母菌诊断方法。
[Abstract]:Objective to establish a rapid detection method for Candida cerevisiae based on loop mediated isothermal amplification (Lampp). Methods the 18s r DNA gene of Candida was conserved. Primer Explorer V4 software was used to design primers, LAMP amplification method and reaction system were established, and four key parameters and three performance indexes of the system were optimized and discussed. Results all the six common Candida cerevisiae were positive by LAMP method. The optimum conditions for amplification were as follows: temperature 63 ~ 65 鈩，

本文编号：1394302