实时荧光环介导恒温扩增检测无乳链球菌方法的建立与评价

发布时间：2018-02-24 02:18

  本文关键词： 无乳链球菌 实时荧光 聚合酶链反应 环介导等温扩增　出处：《中华医院感染学杂志》2016年10期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的建立实时荧光环介导恒温扩增(Rea-LAMP)快速检测无乳链球菌的方法,为无乳链球菌的快速检测提供一种新的方法。方法针对无乳链球菌纤连蛋白fbsB基因的6个区域设计6条特异性引物,利用链置换DNA聚合酶(Bst DNA polymerase)恒温反应60min,通过荧光信号实时检测无乳链球菌。结果研究的反应体系在使用引物1时,扩增效果最好;在10株相关菌株的检测中,除无乳链球菌出现很好的阳性外,其余菌株均为阴性;本研究检测无乳链球菌DNA的灵敏度可达到300pg/μl。结论 Rea-LAMP检测无乳链球菌的特异性强、稳定性高、操作简便快速,具有较大的推广应用前景,可用于无乳链球菌的快速检测。
[Abstract]:Objective to establish a method for rapid detection of streptococcus lactobacillus by real-time fluorescent loop mediated isothermal amplification of Streptococcus lactis. To provide a new method for rapid detection of Streptococcus lactis. Methods six specific primers were designed for the six regions of fbsB gene of Streptococcus lactis. Streptococcus lactis was detected by fluorescence signal for 60 mins by isothermal reaction with chain replacement DNA polymerase BST DNA polymerase. The results showed that the reaction system was the best when the primers were used at 1:00. In this study, the sensitivity of detection of streptococcus lactobacillus DNA was 300pg / 渭 l.Conclusion the detection of streptococcus lactis by Rea-LAMP has strong specificity, high stability and simple and rapid operation. It can be used for rapid detection of streptococcus lactis.
【作者单位】： 广州医科大学附属第三医院检验科;广州医科大学金域检验学院;
【基金】：国家卫计委医药卫生科技发展研究中心基金资助项目(W2015JG07) 广州市卫生局一般引导基金资助项目(20151A011083)
【分类号】：R440

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本文编号：1528496