82株鲍曼不动杆菌的耐药性及耐药相关基因研究

发布时间：2018-03-14 04:15

  本文选题：鲍曼不动杆菌　切入点：耐药基因　出处：《吉林大学》2015年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的： 通过聚合酶链反应（PCR）方法研究本院鲍曼不动杆菌的耐药机制，检测临床分离的82株鲍曼不动杆菌的耐药情况，并检测β-内酰胺类耐药基因、氨基糖苷修饰酶耐药基因、喹诺酮类耐药基因、I类整合酶基因和外膜蛋白基因的阳性率，为今后临床用药提供参考依据。 方法： 1.收集从2011年1月至2014年5月吉林大学第一医院二部住院患者无菌体液标本中分离出的鲍曼不动杆菌（非重复菌株），共82株，用BD phoenixTM-100全自动细菌鉴定/药敏分析仪进行细菌鉴定和药敏试验，头孢哌酮/舒巴坦的药物敏感性检测采用K-B法； 2.采用聚合酶链反应（PCR）法对β-内酰胺类耐药基因（blaOXA-51, blaOXA-23,blaTEM, blaSHV, blaIMP, blaVIM）、氨基糖苷修饰酶耐药基因（aac(6′)-I, aac(3′)-I,ant(3″)-I, ant(2″)-I）、喹诺酮类耐药基因（gyrA, parC）、I类整合酶基因（intI1）和外膜蛋白基因（CarO）进行检测，1.5%琼脂糖凝胶电泳后，凝胶成像系统观察照相并分析。 3.对喹诺酮类耐药相关基因（gyrA和parC）的PCR产物纯化后做HinfI酶切分析，2.5%琼脂糖凝胶电泳后，凝胶系统观察照相，，随机选部分耐药株与敏感株测序分析并验证药敏结果。 结果： 1．药敏结果：82株菌中有65株MDRAB，所有菌株对多粘菌素100%敏感，对亚胺培南、美罗培南和头孢哌酮/舒巴坦的敏感率分别为41.5%、40.2%、29.3%，除阿米卡星、四环素、复方新诺明外，对其他药物的敏感率均低于20%。 2．耐药基因检测结果：82株菌均能检测到blaOXA-51、gyrA、parC基因，对blaOXA-23、intI1、blaTEM、aac(6′)-I、aac(3′)-I、ant(3″)-I、ant(2″)-I、CarO的检出率分别为52.4%、73.2%、70.7%、56.1%、56.1%、65.9%、12.2%、90.2%，未检出blaSHV、blaIMP、blaVIM等基因。 3．酶切结果：仅14（17.1%）株菌的gyrA基因产物能被HinfI酶切开，23（28.0%）株菌的parC基因产物能被HinfI酶切开，测序结果显示喹诺酮类耐药株有基因突变。喹诺酮耐药株gyrA基因的83位氨基酸由Ser变为Leu，parC基因的80位氨基酸由Ser变为Leu；在parC基因被切开的耐药菌株中发现一种新的突变，84位氨基酸由Glu变为Gly，与以往报道的Glu变为Lys不同。 结论： 1.82株鲍曼不动杆菌耐药情况严重，大都为多重耐药鲍曼不动杆菌，碳青霉烯类抗生素敏感率最高；14种耐药基因能检测到11种，未检测到blaSHV、blaIMP、blaVIM等基因，可能存在地区差异性。 2.携带blaOXA-23基因与鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药有关；产OXA-23、OXA-51、TEM型β-内酰胺酶可能是本院鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要原因。 3. aac(6′)-I、aac(3)-I、ant(3″)-I基因在本院鲍曼不动杆菌对氨基糖苷类药物耐药方面起重要作用，ant(2″)-I不是导致本院氨基糖苷类耐药的主要基因。 4.喹诺酮类耐药基因gyrA、parC突变率高导致耐药情况严重，gyrA基因比parC基因在喹诺酮类耐药方面发挥更大的作用；在parC基因中发现新型突变模式，84位氨基酸由Glu变为Gly，但是否与喹诺酮耐药有关仍需验证。
[Abstract]:Objective:
By polymerase chain reaction (PCR) method to study the Bauman resistance mechanisms, detection of clinical isolates of 82 strains of Bauman Acinetobacter resistance, and detection of beta lactam resistance genes, resistance genes of aminoglycoside modifying enzymes, quinolone resistance genes and class I integron positive rate of enzyme gene and membrane protein the gene, for the future to provide reference for clinical medication.
Method锛

本文编号：1609563