肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制研究

发布时间：2018-06-20 04:53

  本文选题：肺炎克雷伯菌 + 碳青霉烯类抗生素　； 参考：《上海交通大学学报(医学版)》2016年01期

【摘要】：目的探讨临床标本中分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药机制。方法收集2010年1月—2013年12月临床标本中分离的CRKP。采用Vitek-2 Compact全自动微生物分析系统进行鉴定并联合纸片扩散法(K-B法)进行药物敏感性试验,Microflex~(TM)MALDI-TOF MS进行菌种复核。改良Hodge试验筛查碳青霉烯酶表型;PCR方法检测bla_(KPC)、bla_(GES)、bla_(IMP)、bla_(VIM)、bla_(NDM-1)和bla_(OXA-48)等碳青霉烯酶基因及AmpC酶基因,并对阳性扩增产物进行基因测序;SDS-PAGE检测菌株外膜蛋白Ompk35和Ompk36的表达情况;对携带碳青霉烯酶基因的菌株进行质粒转移接合试验。结果 75株CRKP中,有71株改良Hodge试验阳性,其中69株携带bla_(KPC-2)基因合并Ompk36变异(68株)或Ompk36缺失(1株);1株携带bla_(IMP-4)基因合并Ompk35和Ompk36变异,1株携带bla_(NDM-1)和bla_(CIT-1)基因合并Ompk35和Ompk36变异。4株改良Hodge试验阴性的菌株中,3株DHA4基因阳性合并Ompk36缺失(1株)或Ompk36变异(2株),另1株未检测到耐药基因但Ompk36缺失。仅4株产碳青霉烯酶菌株(4/71)转移接合试验成功。结论临床标本分离的CRKP对碳青霉烯类抗生素的主要耐药机制为产KPC-2酶合并外膜蛋白表达异常。需加强院内感染预防控制措施,防止此类菌株的播散。
[Abstract]:Objective to investigate the mechanism of drug resistance of Klebsiella pneumoniae isolated from clinical specimens. Methods CRKPs isolated from clinical specimens from January 2010 to December 2013 were collected. Vitek-2 Compact automatic microbiological analysis system and disk diffusion method were used for drug sensitivity test. The modified Hodge test was used to screen the carbapenem phenotypic genes and AMPC C genes, and the expression of Ompk35 and Ompk36 was detected by SDS-PAGE of the positive amplification products, and the expression of Ompk35 and Ompk36 were detected by SDS-PAGE of the positive amplification products. The expression of Ompk35 and Ompk36 were detected by SDS-PAGE of the positive products. The expression of Ompk35 and Ompk36 were detected by SDS-PAGE. The expression of Ompk35 and Ompk36 were detected by SDS-PAGE. The expression of Ompk35 and Ompk36 were detected by SDS-PAGE. Plasmid transfer conjugation test was carried out on strains carrying carbapenase gene. Results of the 75 CRKP strains, 71 were positive for modified Hodge test. Of the 69 strains carrying the blasis-KPC-2) gene combined with Ompk36 mutation 68) or Ompk36 deletion 1 strain carrying blak35 and Ompk36 mutation 1 strain carrying blaster-KPC-1) Ompk35 and Ompk36 mutation 1) and blatiapia CIT-1) combined with Ompk35 and Ompk36 mutation .4 strains negative for improved Hodge test, 3 strains of DHA4 were found to be negative for Hodge test. There were two strains of Ompk36 mutation due to the positive combination of Ompk36 and Ompk36. The other one had not detected the drug resistance gene but Ompk36 deletion. Only 4 strains of carbapenem producing strain 4 / 71) were successfully transferred and conjugated. Conclusion the main drug resistance mechanism of CRKP isolated from clinical specimens to carbapenem antibiotics is the abnormal expression of KPC-2 enzyme and outer membrane protein. The prevention and control measures of nosocomial infection should be strengthened to prevent the spread of these strains.
【作者单位】： 上海交通大学医学院附属新华医院检验科临床微生物室;
【分类号】：R446.5

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