KIR3DL1基因在无关供者HLA全相合异基因造血干细胞移植中的表达及临床意义

发布时间：2018-10-30 17:27

【摘要】：【目的】本项研究采用SSP和流式细胞术方法,研究在初治恶性血液病患者、健康供者及移植后患者表达供者来源的NK细胞表面的KIR3DL1表达水平,并同时从供受者KIR基因型、单倍型、KIR/HLA受配体模式的角度,分析了KIR3DL1的表达,为研究KIR3DL1基因在预示无关造血干细胞移植预后中的作用提供实验依据。【方法】对116例接受无关造血干细胞移植的患者(其中AML和MDS为60例、ALL40例、CML8例、其他6例)和92例正常供者,以及初诊20例白血病患者,采用序列特异性引物聚合酶链反应(sequence specific primers PCR.SSP)和基因测序(Sequence-base typing,SBT)进行KIR和HLA基因分型;采用流式细胞术和4种单抗(CD3、CD56、CD159和CD158e)检测NK细胞表面抑制性KIR3DL1的表达;并从KIR基因型、单倍型、KIR/HLA受配体模式的角度分析初治患者与正常供者KIR3DL1的表达水平。同时结合临床资料分析移植后免疫耐受组、a GVHD组和复发组患者表达供者异源反应性NK细胞和KIR3DL1的表达水平。【结果】1.研究正常供者KIR基因型、单倍体和KIR/HLA受配体模式,及其KIR3DL1的表达1)92例健康供者中KIR-AA,Bx1,Bx2为常见基因型,频率分别为46.8%(43/92),18.5%(17/92),10.2(9/92);KIR-A,B1,B2,B3,B4为常见单体型,频率分别为69%(128/182),11%(20/182),7%(13/182),5%(8/182),1%(2/182)。2)供者KIR3DL1基因识别受者的HLA-BW4配体,在92例供者识别受者HLA-BW4/BW4、HLA-BW4/BW6、HLA-BW6/BW6配体的频率分别为13.79%、67.81%、18.39%,三者之间的分布有统计学差异(P0.0001)。3)单倍型KIR-A/A、KIR-B/x、KIR-B/B的KIR3DL1的中位表达水平分别为18.77%、13.14%、0.37%,三者之间有统计学差异,P值分别是0.039、0.0003、0.0003。在单倍型KIR-B/x中同时表达KIR3DL1/2DL2与无2DL2基因KIR3DL1的表达水平分别为16.3%和11.2%,两者的表达水平无统计学差异。但KIR3DL1的表达水平在单倍型KIR-A/A与单倍型KIR-B/x无2DL2基因中相比有统计学意义(p=0.019)。4)KIR3DL1识别HLA-BW4组(包括配体为HLA-BW4/BW4和BW4/BW6)与KIR3DL1不识别HLA-BW4组(HLA-BW6/BW6)的表达水平分别是17.61%和10.65%,两者的表达水平有统计学差异(p=0.006)。2.KIR3DL1在无关供者HLA全相合造血干细胞移植后的表达及临床意义1)在基因型KIR-AA组正常供者和恶性血液病初治患者的KIR3DL1的中位表达水平为20.39%和9.7%;KIR-Bx组两者KIR3DL1的中位表达水平为15.94%和6.8%,有统计学差异(p=0.038,p=0.023)。2)在免疫耐受组中KIR3DL1在移植后1、2、3个月的表达水平分别是27.74%、23.56%、26.61%,与正常供者的表达水平相比均无统计学差异(p0.05)。KIR3DL1识别HLA-BW4组与HLA-BW4不识别组在移植后1个月的表达水平分别是21.86%和16.54%(p=0.046);2个月的表达水平分别是19.51%和16.54%(p=0.27);3个月的表达水平分别是19.19%和10.86%(p=0.014)。3)供者为KIR-AA基因型移植后复发组的KIR3DL1中位表达水平低于免疫耐受组,在1个月时表达水平为19.11%,与免疫耐受组相比有统计学差异(p=0.023),而2、3个月时的表达水平虽低,分别是19.84%和13.69%,与免疫耐受组相比无统计学差异。而供者为KIR-Bx基因型复发组的KIR3DL1中位表达水平均低于免疫耐受组,但未显示统计学差异。同时当免疫耐受组与复发组均为KIR3DL1识别HLA-BW4组复发组KIR3DL1的表达水平低于免疫耐受组,但无明显统计学差异。4)当供者KIR3DL1不识别HLA-BW6/BW6配体时,在a GVHD组1-3个月KIR3DL1的表达水平高于免疫耐受组,但均无统计学差异。5)供者为KIR-Bx基因型的OS高于供者为KIR-AA基因型,两者相比有统计学差异(p=0.034)。【结论】除了KIR-BB不表达KIR3DL1以外,KIR3DL1基因在KIR-AA和KIR-AB中均表达。KIR3DL1的配体在HLA-BW4/BW6杂合组比例最高,呈偏态分布。初治恶性血液病患者NK细胞表面KIR3DL1表达水平较正常供者明显降低,移植后复发组KIR3DL1的表达水平低于免疫耐受组。供者为KIR-Bx基因型的OS高于供者为KIR-AA基因型。因此,从KIR基因型、单倍型、KIR/HLA受配体模式的角度进行分析,对预示无关供者异基因造血干细胞移植预后有一定的临床应用价值。
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【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R457.7

【参考文献】