万古霉素诱导金黄色葡萄球菌生物膜形成及机制研究

发布时间：2019-04-17 10:02

【摘要】：目的:万古霉素是治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)感染的首选药物。近年来,随着万古霉素临床应用增加,其敏感性逐渐减低,导致感染持续存在。异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌(hVISA,其表型敏感,但也存在耐药亚群)的存在与持续性感染以及万古霉素治疗失败高度相关,但其具体机制尚不清楚。本研究通过将一株临床分离的hVISA菌株10827用不同浓度梯度的万古霉素进行体外诱导,并检测原代菌株与系列诱导菌株的生物膜形成能力及其生物膜形成相关基因的mRNA量,初步探讨万古霉素诱导金黄色葡萄球菌生物膜形成及其机制。方法:(1)将一株临床菌株(菌株编号:10827,MIC为2μg/ml,经过宏量E-test方法证实其为hVISA)用不同浓度梯度的万古霉素进行连续传代诱导,用E-test方法检测菌株的MIC值;(2)使用比色法检测所有菌株的生长情况;(3)使用微量平板法检测原代菌株及其系列诱导菌株的生物膜形成能力;(4)使用扫描电镜观察生物膜的微观结构;(5)采用荧光定量PCR方法检测生物膜形成相关基因的mRNA量。结果:(1)10827菌株通过体外诱导实验获得了一系列MIC值递增的同源性菌株,根据万古霉素的MIC值,分别命名为10827-V8、10827-V16和10827-V32;(2)系列诱导菌株与原代菌株相比,随着万古霉素MIC值的升高,细菌的生长速度逐渐降低,生物膜形成能力逐渐增强;(3)扫描电镜显示随着万古霉素MIC值的升高,细菌相互聚集成团,出现小梁状生物膜结构以及粗糙的细胞表面;(4)系列诱导菌株与原代菌株相比,随着万古霉素MIC值的升高,fnbA、icaA、atlA和sarA基因的的mRNA量逐渐增加,icaR基因的mRNA量逐渐减低。结论:(1)万古霉素可以在体外诱导hVISA菌株的耐药性增强,并且在诱导过程中,细菌的生物膜形成能力逐渐增加;(2)在万古霉素诱导过程中,与生物膜初始黏附阶段相关的fnbA、atlA和sarA基因以及与聚集和增殖阶段相关的icaA、icaR和sarA基因的mRNA量增加,可能与生物膜形成有关。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：蚌埠医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R446.5

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本文编号：2459329