儿童感染沙门菌耐药特点及鉴定方法的研究

发布时间：2019-09-22 07:23

【摘要】：目的研究引起儿童感染的沙门菌耐药特点及快速鉴定方法。方法选择沙门菌75株,使用标准生物化学和血清学试验对所有菌株进行鉴定;使用16S rRNA基因测序法鉴定;使用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)法鉴定,以上两种方法结果与传统培养方法结果进行比对分析。使用Kerby-Bauer纸片扩散法对常用抗生素进行敏感性试验,使用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)测定对广谱β-内酰胺类药物耐药的基因。结果 75株沙门菌中,鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌检出率最高,分别为32株和26株。16S rRNA基因测序法与传统培养法的符合率为100%。MALDI-TOF-MS法的属符合率为100%,其中鉴定率在99.9%以上的为17株,90%以上的为32株,80%以上的为26株,结果均可信,但其对具体血清型的符合率不高。75株沙门菌中,耐药率最高的是氨苄西林(69.3%,52/75),其次是氨苄西林/舒巴坦(44.0%,33/75),第三是萘啶酸(42.7%,32/75)。75株沙门菌中共检出19株对广谱β-内酰胺类药物耐药,占25.3%。19株中有15株携带bla CTX-M基因(8株为bla CTX-M-14,2株为bla CTX-M-9,1株为bla CTX-M-34,2株为bla CTX-M-3,2株为bla CTX-M-15),8株携带bla TEM-1基因,4株携带bla OXA-1基因。结论 16S rRNA基因测序法作为细菌鉴定的金标准,以其快速准确著称,可作为传统鉴定法的补充方法。MALDI-TOF-MS法可以快速鉴定沙门菌,但仅在科研模式下指向性地提示血清型,因此需采用其他辅助技术进行鉴定。引起儿童腹泻的沙门菌对多种抗生素耐药,对3代头孢菌素类的耐药主要由bla CTX-M型引起。
【图文】：

电泳图,电泳图,沙门菌,亚型

第3期胡立新等:儿童感染沙门菌耐药特点及鉴定方法的研究沙门菌株中，21株对所有的抗生素均敏感，15株对1种抗生素耐药，5株对2种抗生素耐药，34株对3种及以上的抗生素耐药。其中耐药率最高的是氨苄西林(69.3%，52/75)，其次是氨苄西林/舒巴坦(44.0%，33/75)，萘啶酸(42.7%，32/75)，详见表5。75株沙门菌中共检出19株对广谱β－内酰胺类耐药，占25.3%。图1PCＲ扩增电泳图Fig.1PCＲamplificationN:negativecontrol;M:marker;No.1－16:Salmonellarespectively．表5沙门菌抗生素敏感试验结果Tab.5ＲesultsofantibioticsensitivitytestofSalmonellaNameofantibioticsＲesistanceNumberＲatio/%IntermediaryNumberＲatio/%SensitiveNumberＲatio/%Ampicillin5269.3002330.7Chloramphenicol1216.022.76181.3Ciprofloxacin68.0912.06080.0Ceftriaxone1925.311.35573.3Cefepime1520.0006080.0Imipenem000075100.0Meropenem000075100.0Sulfamethoxazole1418.7006181.3Ceftazidime2026.711.35472.0Ampilillin-sulbactam3344.034.03952.0Nalidixicacid3242.722.74154.775株沙门菌中共检出对广谱β－内酰胺类耐药的菌株19株，占25.3%。19株沙门菌中有2株未扩增出β－内酰胺类耐药基因，其中携带blaTEM基因的有8株，经DNA测序表明均为blaTEM-1型;携带blaOXA基因的有4株，经DNA测序表明均为blaOXA-1型;携带blaCTX-M基因的有15株，包括blaCTX-M-1型5株，blaCTX-M-9型10株。经DNA测序表明，5株blaCTX-M-1型中，1株为blaCTX-M-1亚型，2株为blaCTX-M-3亚型，2株为blaCTX-M-15亚型。10株blaCTX-M-9型中，2株为blaCTX-M-9亚型，8株为blaCTX-M-14亚型。未检出blaSHV基因、blaCTX-M-2基因和blaCTX-M-8基因。具体的基因型及分布?

电泳图,电泳图,沙门菌,亚型

第3期胡立新等:儿童感染沙门菌耐药特点及鉴定方法的研究沙门菌株中，21株对所有的抗生素均敏感，15株对1种抗生素耐药，5株对2种抗生素耐药，34株对3种及以上的抗生素耐药。其中耐药率最高的是氨苄西林(69.3%，52/75)，其次是氨苄西林/舒巴坦(44.0%，33/75)，萘啶酸(42.7%，32/75)，详见表5。75株沙门菌中共检出19株对广谱β－内酰胺类耐药，占25.3%。图1PCＲ扩增电泳图Fig.1PCＲamplificationN:negativecontrol;M:marker;No.1－16:Salmonellarespectively．表5沙门菌抗生素敏感试验结果Tab.5ＲesultsofantibioticsensitivitytestofSalmonellaNameofantibioticsＲesistanceNumberＲatio/%IntermediaryNumberＲatio/%SensitiveNumberＲatio/%Ampicillin5269.3002330.7Chloramphenicol1216.022.76181.3Ciprofloxacin68.0912.06080.0Ceftriaxone1925.311.35573.3Cefepime1520.0006080.0Imipenem000075100.0Meropenem000075100.0Sulfamethoxazole1418.7006181.3Ceftazidime2026.711.35472.0Ampilillin-sulbactam3344.034.03952.0Nalidixicacid3242.722.74154.775株沙门菌中共检出对广谱β－内酰胺类耐药的菌株19株，占25.3%。19株沙门菌中有2株未扩增出β－内酰胺类耐药基因，其中携带blaTEM基因的有8株，经DNA测序表明均为blaTEM-1型;携带blaOXA基因的有4株，，经DNA测序表明均为blaOXA-1型;携带blaCTX-M基因的有15株，包括blaCTX-M-1型5株，blaCTX-M-9型10株。经DNA测序表明，5株blaCTX-M-1型中，1株为blaCTX-M-1亚型，2株为blaCTX-M-3亚型，2株为blaCTX-M-15亚型。10株blaCTX-M-9型中，2株为blaCTX-M-9亚型，8株为blaCTX-M-14亚型。未检出blaSHV基因、blaCTX-M-2基因和blaCTX-M-8基因。具体的基因型及分布?
【作者单位】：首都医科大学附属北京儿童医院检验中心;
【分类号】：R446.5;R725.1

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