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新型阳离子聚合物聚磷酰胺的合成及作为基因/siRNA转运载体的体外实验研究

发布时间:2020-12-20 06:33
  一、研究背景基因治疗是随着DNA重组技术而发展起来的新型治疗手段和策略,通常是将正常基因或有治疗作用的DNA/RNA导入靶细胞以纠正或替代个体自身结构和功能缺陷的基因,抑制异常活性/表达的基因,从而达到干预疾病的发生、发展及进程的目的[1,2]。基因治疗的巨大挑战之一是设计合适的基因转移载体,它是基因治疗获得较好疗效的关键要素。基因治疗的载体系统通常可分为病毒相关的载体系统和非病毒相关的载体系统两种,这两种基因转移系统已广泛地应用于基因治疗及基因转染等体内外研究[3-5]。病毒相关的载体系统尽管较非病毒相关的载体系统具有较高的转导效率和基因表达效率,但是病毒载体较非病毒载体存在着潜在的安全风险,而且病毒载体的制备方法比较复杂,它也不能直接转移治疗药物,此外,其制备的费用也较为昂贵。而非病毒转移载体除了可转移治疗基因外,还可转移治疗用的药物、抗体、寡聚核苷酸、siRNA等,因此,它因具有低毒、低免疫原性、结构灵活可控、合成简便且费用低廉等特点,正成为基因治疗备受瞩目的新的发展领域[6]。非病毒载体中利用生化的方法进行的基因治疗的转染如初期的磷酸钙转染法,其转染效率很低,并且对很多的细胞株... 

【文章来源】:南方医科大学广东省

【文章页数】:90 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
前言
材料与方法
    1 材料
    2 方法
实验结果
    1. 聚磷酰胺聚合物(PPA)的化学合成
    2. 聚磷酰胺的核磁共振光谱测定
    3 聚磷酰胺结合DNA能力的检测
    4. PPA/pDNA复合物颗粒大小和电极电位测定
    5. 聚磷酰胺(PPA)的细胞毒性检测
    6. 聚磷酰胺(PPA)介导的质粒转染
    7. 聚磷酰胺(PPA)转染的GFP-PKD2在细胞内过量表达且在特定刺激下表现出磷酸化激活活性
    8. PPA能介导多个基因进入靶细胞且靶基因可表达其功能活性
    9. PPA介导的siRNA的转染
    10. 聚磷酰胺(PPA)转染的siRNA-PKD2能有效地抑制p65的核转位
    11.聚磷酰胺(PPA)转染的siRNA-PKD2能有效地抑制p65的核转位
讨论
结论
参考文献
中英文缩略词对照表
硕士研究生期间研究成果
致谢


【参考文献】:
期刊论文
[1]卵巢癌基因与卵巢癌基因治疗的研究进展[J]. 李大伟,李爱军.  南阳理工学院学报. 2013(03)
[2]新一代阳离子聚合物转染试剂(梭华-Sofast)转染效果研究[J]. 杨天赐,陈明桥,黄革玲.  厦门大学学报(自然科学版). 2004(04)



本文编号:2927387

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