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不动杆菌属OXA-23及OXA-24/40型碳青霉烯酶传播机制研究

发布时间:2021-02-04 03:49
  不动杆菌属是院内感染重要致病菌之一,以鲍曼-醋酸钙不动感杆菌复合体为主,可引起肺炎、皮肤软组织感染、伤口感染、尿路感染、脑膜炎以及血流感染等。近年来,不动杆菌属碳青霉烯耐药率不断上升,给临床用药与治疗形成了极大的挑战,而不动杆菌属碳青霉烯耐药的主要机制之一为产OXA型碳青霉烯酶。本研究对国内不动杆菌属OXA-23与OXA-24/40型碳青霉烯酶的传播机制进行了深入分析。OXA-23酶是不动杆菌属中最常见的OXA类碳青霉烯酶。本课题组于2009年1月至2010年12月在全国18个省、28家医院收集了产OXA-23型碳青霉烯酶的60株鲍曼不动杆菌与3株院内不动杆菌,这些菌株来自不同省市地区以代表不同的遗传背景。研究通过PCR扩增blaOXA-23基因周围结构,S1/ApaI-PFGE-Southern blot明确blaOXA-23基因定位,并通过微量肉汤稀释法明确菌株美罗培南、亚胺培南的MIC值,探讨其耐药性与基因定位、拷贝数的关系。此外,借助电转化、接合转移等方式检测质粒的转移能力,并对代表性质粒进行了高通量测序与序列分析。研究结果显示,携带染色体编码blaOXA-23基因的共有35株... 

【文章来源】:浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:127 页

【学位级别】:博士

【文章目录】:
致谢
中文摘要
Abstract
英文缩略语表
第一部分 不动杆菌属OXA-23型碳青霉烯酶传播机制研究
    引言
    1 材料与方法
        1.1 材料
            1.1.1 菌株来源
            1.1.2 试剂和仪器
        1.2 研究方法
            1.2.1 体外药物敏感性试验
            1.2.2 菌种鉴定
OXA-23基因筛查">            1.2.3 blaOXA-23基因筛查
OXA-23基因定位分析">            1.2.4 blaOXA-23基因定位分析
OXA-23基因周围结构">            1.2.5 PCR扩增blaOXA-23基因周围结构
            1.2.6 细菌质粒提取
            1.2.7 质粒接合
            1.2.8 质粒电转化
            1.2.9 质粒复制子分型
OXA-23质粒高通量测序">            1.2.10 blaOXA-23质粒高通量测序
            1.2.11 PCR扩增新型复制子
    2 结果
OXA-23阳性菌株鉴定结果及分子分型">        2.1 blaOXA-23阳性菌株鉴定结果及分子分型
        2.2 药敏结果
OXA-23基因的定位">        2.3 blaOXA-23基因的定位
            2.3.1 质粒定位
            2.3.2 染色体定位
OXA-23基因定位与碳青霉烯药敏">        2.4 blaOXA-23基因定位与碳青霉烯药敏
OXA-23基因周围结构">        2.5 blaOXA-23基因周围结构
OXA-23质粒可转移性分析">        2.6 blaOXA-23质粒可转移性分析
OXA-23质粒结构分析">        2.7 blaOXA-23质粒结构分析
        2.8 质粒复制子分型
    3 讨论
    4 结论
    参考文献
第二部分 不动杆菌属OXA24/40-like碳青霉烯酶传播机制研究
    引言
    1 材料与方法
        1.1 材料
            1.1.1 菌株来源
            1.1.2 试剂和仪器
        1.2 研究方法
            1.2.1 PFGE
            1.2.2 细菌质粒提取
OXA-24/40-like基因周围结构分析">            1.2.3 blaOXA-24/40-like基因周围结构分析
OXA-24/40-like质粒高通量测序">            1.2.4 blaOXA-24/40-like质粒高通量测序
    2 结果
        2.1 分子分型
OXA-24/40-like基因周围结构">        2.2 blaOXA-24/40-like基因周围结构
            2.2.1 PCR walking结果
OXA-24/40-like基因周围结构分析">            2.2.2 blaOXA-24/40-like基因周围结构分析
        2.3 质粒高通量测序结果
    3 讨论
    4 结论
    参考文献
文献综述
    参考文献
作者简历及在读期间所取得的科研成果


【参考文献】:
期刊论文
[1]2013年中国CHINET细菌耐药性监测[J]. 胡付品,朱德妹,汪复,蒋晓飞,孙自镛,陈中举,胡志东,李金,谢轶,康梅,徐英春,张小江,张朝霞,季萍,王传清,王爱敏,倪语星,孙景勇,俞云松,林洁,储云卓,田素飞,徐元宏,沈继录,单斌,杜艳,卓超,苏丹虹,张泓,孔菁,魏莲花,吴玲,胡云建,艾效曼.  中国感染与化疗杂志. 2014(05)
[2]细菌毒素-抗毒素系统的研究进展[J]. 王晓蕾,赵龙旋,张俊杰.  生物化学与生物物理进展. 2008(09)



本文编号:3017674

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