结节性硬化症TSC1/TSC2基因突变的高通量测序快速诊断

发布时间：2021-03-07 13:05

　　目的建立结节性硬化症TSC1/TSC2基因高通量测序技术以快速准确检测结节性硬化的TSC基因突变。方法对10例结节性硬化症患者及10例正常对照进行研究,利用长链PCR方法扩增TSC1及TSC2基因所有外显子区域,运用Ion PGMTM平台进行二代测序并运用常规测序验证。结果设计引物对TSC1及TSC2基因特异性扩增出7个长片段产物,产物长度介于13 kb¹5 kb间;运用二代测序技术快速鉴定出10个致病突变,其中,7个突变位于TSC2基因,3个突变位于TSC1基因;所有突变经常规Sanger测序验证,结果一致。结论高通量二代测序技术可快速可靠诊断结节性硬化症TSC1、TSC2基因突变。 

【文章来源】：细胞与分子免疫学杂志. 2016,32(01)北大核心

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1. 1 材料
    1. 2 方法
        1.2.1基因组DNA提取
        1.2.2长片段PCR扩增
        1.2.3文库构建
        1.2.4模板扩增及纯化
        1.2.5测序反应
        1.2.6数据分析
        1.2.7数据验证
2 结果
    2. 1 长片段PCR产物
    2. 2 文库质量评价
    2. 3 测序结果及检测结果的功能预测
    2. 4 Sanger测序验证
3 讨论



本文编号：3069149