耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌分子特征及替加环素联合头孢哌酮/舒巴坦对其抗菌作用的研究
发布时间：2021-08-05 05:12
目的：分析耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌（carbapenem-resistant Acinetobacter 6aumannii,CRAB）的分子特征并评价替加环素联合头孢哌酮/舒巴坦对CRAB的体外、体内及细胞内活性。方法：（1）应用RT-PCR检测我院临床分离的非重复87株CRAB携带blaTEM, blaGES,blaSHV, blaKPC,blnCTX-M-1,blaVIM-1,blaVIM-2,blaIMP-1,blaIMP-2,blanSIM-1, blaNDM-1,blaOXA-23-like,blaOXA-24-like,blaOXA-51-like,blaOXA-58-like等15个碳青霉烯酶耐药基因情况并测序。（2）应用微量肉汤稀释法测定联合抑菌指数（FICI）,应用时间—杀菌曲线评价替加环素、头孢哌酮/舒巴坦及联合用药的体外效果。（3）C57BL/6小鼠腹腔内注射最低致死剂量的CRAB建立腹膜炎/脓毒症小鼠模型,分析给药4h和18h小鼠血、肺、肝、脾、肾各脏器菌落数并观察病理。 （4）建立细胞内感染鲍曼不动杆菌模型：小鼠单核巨噬细胞RAW264.7与CRAB孵育4h...
【文章来源】：中国人民解放军医学院北京市
【文章页数】：102 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．１典型阳性基因ＰＣＲ扩增产物电泳图??
ＡＢ－８菌株、在２４ｈ内能清除ＡＢ－４４和ＡＢ－１４菌株。培养时间延长至４８?ｈ，这些??联合用药作用下的细菌未出现再生长。我们同时评价复合制剂头孢呢酮／舒巴坦各??自的成分在联合用药中的作用（图２．３），结果表明：１／２ＸＭＩＣ的替加环素和等剂??量的舒巴坦联合在２４ｈ内不能清除ＡＢ－８和ＡＢ－４４，２４?ｈ后出现了细菌的再生长。??因此，替加环素联合头孢呢酮／舒巴坦的杀菌活性优于替加环素联合等剂量的舒巴??坦（Ｐ＜０．０５）?０??１２「（Ａ）?Ｉ?ＡＢ－８?Ｉ?「（Ｂ）?ＡＢ－４４??Ｉ?１?１０?－???＾??！：■％??０?Ｌ＿＿，?，?，＿．?Ｘ?■?０?——‘——‘——‘——‘＾＼?‘）（??０?２?４?８?１２?２４?４８?０?２?４?８?１２?２４?４８??时间（ｈ）?＿（ｈ＞??［（Ｄ）?Ｉ?ＡＢ－１４?１??１０?－?‘?‘?１０?－??０?＾＾?‘?＾?‘?‘?‘?０??‘?１?１?１?￣１＾＿＿Ｉ??０?２?４?８?１２?２４?０?２?４?８?１２?２４?４８??吋间…）?时间⑶??图２．２替加环素、头孢呢酮／舒巴坦单独和联合应用对４株广泛耐药鲍受不动杆菌的时间一杀??菌曲线。??注：（Ａ）?ＡＢ－８?（ＦＩＣＩ＝０．１３）?；?（Ｂ）?ＡＢ－４４?（ＦＩＣＩ＝０．７５）?；?（Ｃ）?ＡＢ－１９?（ＦＩＣＩ＝１．５）；??（Ｄ）?ＡＢ－１４?（ＦＩＣＩ＝０．３７５）?。?？??—阴性对照，…Ａ…１／２Ｘ?ＭＩＣ替加环素，…口…１／２Ｘ?ＭＩＣ头孢呢酮／舒巴坦，…Ｘ…１／２Ｘ??ＭＩＣ替加环素联合头孢呢酮／舒巴坦
呢酮／舒巴坦和模型组明显下降（Ｐ＜０．０５）。给药组小鼠的死亡时间均发生在２０?ｈ??后，若持续观察３６ｈ，仍未死亡的小鼠在连续观察７天后仍无死亡。各小鼠的生??存曲线见图３．１。联合用药组小鼠精神状态整体要好于其他组小鼠。??表３．５接种细菌１２ｈ后模型组（Ｍ组）和对照组（Ｃ组）小鼠的体温、血细胞的变化情况??体温?ＷＢＣ?Ｇ％?Ｌ％?Ｍ％?ＰＬＴ??Ｃ?组?３６．８±０．５?５．７士?０．８?１６．１士０．７?７９．７±?１．２?４．２±?０．４?８３８．８士?３２．３??Ｍ?组?３４．１±１．２＂?１．６±０．７＂?２０．４±?１．６?７５．６土?１．６?２．８±０．６＊?３０１．３±?１０．７＂??？？Ｐ＜０．０１，?＊Ｐ＜０．０５?ＶＳ?对照组??１００－豆?，?Ｔ??９０－?；??一?：?Ｉ?一?Ｃ??承?７０－?－－??一?６０－?；?…Ｍ??＾?５０－?．???Ｉ??—＾?ＴＴ??５?４０－?Ｉ?—?ＴＣ??他?３０－?！?ｍ??２０－?ＴＴＣ??１０－?；?ＴＴＳ??０?Ｉ?Ｉ?Ｉ?１—＊?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ??８?１２?１６?２０?２４?２８?３２?３６??接种时Ｍ?Ｃｈ）??图３．１各组小鼠的生存曲线。注：Ｃ：对照组；Ｍ：模型组；ＴＴ：替加环素单药组；ＴＣ：头??抱哌酮／舒巴坦组；ＴＴＣ：替加环素联合头孢呢酮／舒巴坦组；ＴＴＳ：替加环素联合舒巴坦组。??３．４病理观察组织学炎症??各组的肾脏在接种后各时间点没有观察到组织学的变化（图３．２）。接种２ｈ??后
【参考文献】：
期刊论文
[1]2013年中国CHINET细菌耐药性监测[J]. 胡付品,朱德妹,汪复,蒋晓飞,孙自镛,陈中举,胡志东,李金,谢轶,康梅,徐英春,张小江,张朝霞,季萍,王传清,王爱敏,倪语星,孙景勇,俞云松,林洁,储云卓,田素飞,徐元宏,沈继录,单斌,杜艳,卓超,苏丹虹,张泓,孔菁,魏莲花,吴玲,胡云建,艾效曼. 中国感染与化疗杂志. 2014(05)
[2]中国九城市成人医院获得性肺炎微生物学与临床特点调查[J]. 刘又宁,曹彬,王辉,陈良安,佘丹阳,赵铁梅,梁志欣,孙铁英,李燕明,童朝晖,王臻,贺蓓,杨薇,瞿介明,李向阳,陈荣昌,叶枫,康健,李尔然,陈萍,郑岩,马忠森,任锦,施毅,孙文逵,冯玉麟,范红,姜淑娟,张嵩,熊盛道,左鹏,王占伟. 中华结核和呼吸杂志. 2012 (10)
[3]脓毒症动物模型制作方略及应用[J]. 汤耀卿,李磊. 中华实验外科杂志. 2006(12)
[4]新型甘氨酰环素类抗菌药物替加环素的体外药敏试验操作规程[J]. 王辉,倪语星,陈民钧,胡必杰,王明贵,陈佰义,胡继红,胡云建. 中华检验医学杂志. 2009 (11)
本文编号：3323134
【文章来源】：中国人民解放军医学院北京市
【文章页数】：102 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．１典型阳性基因ＰＣＲ扩增产物电泳图??
ＡＢ－８菌株、在２４ｈ内能清除ＡＢ－４４和ＡＢ－１４菌株。培养时间延长至４８?ｈ，这些??联合用药作用下的细菌未出现再生长。我们同时评价复合制剂头孢呢酮／舒巴坦各??自的成分在联合用药中的作用（图２．３），结果表明：１／２ＸＭＩＣ的替加环素和等剂??量的舒巴坦联合在２４ｈ内不能清除ＡＢ－８和ＡＢ－４４，２４?ｈ后出现了细菌的再生长。??因此，替加环素联合头孢呢酮／舒巴坦的杀菌活性优于替加环素联合等剂量的舒巴??坦（Ｐ＜０．０５）?０??１２「（Ａ）?Ｉ?ＡＢ－８?Ｉ?「（Ｂ）?ＡＢ－４４??Ｉ?１?１０?－???＾??！：■％??０?Ｌ＿＿，?，?，＿．?Ｘ?■?０?——‘——‘——‘——‘＾＼?‘）（??０?２?４?８?１２?２４?４８?０?２?４?８?１２?２４?４８??时间（ｈ）?＿（ｈ＞??［（Ｄ）?Ｉ?ＡＢ－１４?１??１０?－?‘?‘?１０?－??０?＾＾?‘?＾?‘?‘?‘?０??‘?１?１?１?￣１＾＿＿Ｉ??０?２?４?８?１２?２４?０?２?４?８?１２?２４?４８??吋间…）?时间⑶??图２．２替加环素、头孢呢酮／舒巴坦单独和联合应用对４株广泛耐药鲍受不动杆菌的时间一杀??菌曲线。??注：（Ａ）?ＡＢ－８?（ＦＩＣＩ＝０．１３）?；?（Ｂ）?ＡＢ－４４?（ＦＩＣＩ＝０．７５）?；?（Ｃ）?ＡＢ－１９?（ＦＩＣＩ＝１．５）；??（Ｄ）?ＡＢ－１４?（ＦＩＣＩ＝０．３７５）?。?？??—阴性对照，…Ａ…１／２Ｘ?ＭＩＣ替加环素，…口…１／２Ｘ?ＭＩＣ头孢呢酮／舒巴坦，…Ｘ…１／２Ｘ??ＭＩＣ替加环素联合头孢呢酮／舒巴坦
呢酮／舒巴坦和模型组明显下降（Ｐ＜０．０５）。给药组小鼠的死亡时间均发生在２０?ｈ??后，若持续观察３６ｈ，仍未死亡的小鼠在连续观察７天后仍无死亡。各小鼠的生??存曲线见图３．１。联合用药组小鼠精神状态整体要好于其他组小鼠。??表３．５接种细菌１２ｈ后模型组（Ｍ组）和对照组（Ｃ组）小鼠的体温、血细胞的变化情况??体温?ＷＢＣ?Ｇ％?Ｌ％?Ｍ％?ＰＬＴ??Ｃ?组?３６．８±０．５?５．７士?０．８?１６．１士０．７?７９．７±?１．２?４．２±?０．４?８３８．８士?３２．３??Ｍ?组?３４．１±１．２＂?１．６±０．７＂?２０．４±?１．６?７５．６土?１．６?２．８±０．６＊?３０１．３±?１０．７＂??？？Ｐ＜０．０１，?＊Ｐ＜０．０５?ＶＳ?对照组??１００－豆?，?Ｔ??９０－?；??一?：?Ｉ?一?Ｃ??承?７０－?－－??一?６０－?；?…Ｍ??＾?５０－?．???Ｉ??—＾?ＴＴ??５?４０－?Ｉ?—?ＴＣ??他?３０－?！?ｍ??２０－?ＴＴＣ??１０－?；?ＴＴＳ??０?Ｉ?Ｉ?Ｉ?１—＊?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ??８?１２?１６?２０?２４?２８?３２?３６??接种时Ｍ?Ｃｈ）??图３．１各组小鼠的生存曲线。注：Ｃ：对照组；Ｍ：模型组；ＴＴ：替加环素单药组；ＴＣ：头??抱哌酮／舒巴坦组；ＴＴＣ：替加环素联合头孢呢酮／舒巴坦组；ＴＴＳ：替加环素联合舒巴坦组。??３．４病理观察组织学炎症??各组的肾脏在接种后各时间点没有观察到组织学的变化（图３．２）。接种２ｈ??后
【参考文献】：
期刊论文
[1]2013年中国CHINET细菌耐药性监测[J]. 胡付品,朱德妹,汪复,蒋晓飞,孙自镛,陈中举,胡志东,李金,谢轶,康梅,徐英春,张小江,张朝霞,季萍,王传清,王爱敏,倪语星,孙景勇,俞云松,林洁,储云卓,田素飞,徐元宏,沈继录,单斌,杜艳,卓超,苏丹虹,张泓,孔菁,魏莲花,吴玲,胡云建,艾效曼. 中国感染与化疗杂志. 2014(05)
[2]中国九城市成人医院获得性肺炎微生物学与临床特点调查[J]. 刘又宁,曹彬,王辉,陈良安,佘丹阳,赵铁梅,梁志欣,孙铁英,李燕明,童朝晖,王臻,贺蓓,杨薇,瞿介明,李向阳,陈荣昌,叶枫,康健,李尔然,陈萍,郑岩,马忠森,任锦,施毅,孙文逵,冯玉麟,范红,姜淑娟,张嵩,熊盛道,左鹏,王占伟. 中华结核和呼吸杂志. 2012 (10)
[3]脓毒症动物模型制作方略及应用[J]. 汤耀卿,李磊. 中华实验外科杂志. 2006(12)
[4]新型甘氨酰环素类抗菌药物替加环素的体外药敏试验操作规程[J]. 王辉,倪语星,陈民钧,胡必杰,王明贵,陈佰义,胡继红,胡云建. 中华检验医学杂志. 2009 (11)
本文编号：3323134
本文链接：https://www.wllwen.com/huliyixuelunwen/3323134.html
最近更新
教材专著
