新型凝胶多糖纳米粒子的制备及体外递送siRNA研究

发布时间：2024-05-26 20:52

　　RNA干扰(RNAi)是一种转录后水平的基因调节作用,利用RNAi所产生的基因沉默现象能够用于癌症等疾病的临床治疗,而RNAi临床应用的关键之一是构建安全有效的递送载体,以实现对基因药物的有效递送。本文以天然curdlan多糖为原料,首先通过对其结构单元的C6位进行叠氮和还原,制备不同氨基化程度(30%,50%,70%和100%)的6-氨基-6-脱氧-凝胶多糖(6AC)。经IR和13CNMR确定结构,通过激光粒度仪和扫描电镜测试所形成纳米粒子的粒径分布、形貌、Zeta电位,并通过酸碱滴定的方法测定对H。的缓冲能力；然后通过体外细胞siRNA转染试验对其作为基因载体的安全性及对基因递送效率等做了研究。研究结果表明此新型的6AC能形成粒径约为120nm的纳米粒子,且其水溶液具有很好的氢离子负载能力和正的Zeta电位值,6AC与siRNA结合后形成粒径约为130nm的粒子：此载体对于HepG2细胞和Hela细胞显示了较低的细胞毒性,对于A549、H727、HCT116, THP-1和MEF细胞,能够高效率递送siRNA使内源性靶标mRNA水平下调70-90%,而且对于小鼠胚胎干细胞能显著地在...

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．３?ｓｉＲＮＡ的基因沉默机理??Ｆｉｇ．１．３?Ｄｅｌｉｖｅｒｙ?ｏｆ?ｓｉ民ＮＡ?化ｅｒａｐｅｕｔｉｃ??

Ｆｉｇ．１．３?Ｄｅｌｉｖｅｒｙ?ｏｆ?ｓｉ民ＮＡ?化ｅｒａｐｅｕｔｉｃ??１．３．２?ＳｉＲＮＡ治疗的限制因素??通过静脉注射可Ｗ将ＳｉＲＮＡ递送到组织，如图１．４所示，ＳｉＲＮＡ经过静脉注射后，通过??血液循环将ＳｉＲＮＡ递送分散到组织，在姐织内，ＳｉＲＮＡ离开血管进入间隙，....

图１．４?ＳｉＲＮＡ进入细胞的过程??Ｆｉｇ?１．４?Ｔｈｅ?ｐｒｏｃｅｓｓ?ｏｆ?ｄｅｌｉｖｅｒｉｎｇ?ｓｉＲＮＡ?ｉｍｏ?ｃｅｌｌｓ??

Ｉ?ｎｉＲＮＡ?Ｃｌｅａｖａｇｅ??ＡＡＡＡＡＡ／?＂ＷＶＷ??图１．３?ｓｉＲＮＡ的基因沉默机理??Ｆｉｇ．１．３?Ｄｅｌｉｖｅｒｙ?ｏｆ?ｓｉ民ＮＡ?化ｅｒａｐｅｕｔｉｃ??１．３．２?ＳｉＲＮＡ治疗的限制因素??通过静脉注射可Ｗ将ＳｉＲＮＡ递送到组织，如图１．４所示，ＳｉＲ....

图１．６单层脂质体（Ａ）与多层脂巧体（Ｂ）的结构??Ｆｉｇｌ?．６?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ?ｏｆＭｏｎｏｌａｙｅｒ?ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ?（Ａ）?ａｎｄ?ｔｈｅ?ｍｕｌｔｉｌａｙｅｒ?ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ?（Ｂ）??

内蒙古大学硕＋学位论文脂质体载体??质体具有双分子层的囊泡结构，是一种人工膜，己经成为基因治疗中的常用水的部分围绕在磯脂双分子层的内部，为单层脂质体，如图（Ａ）所示；如果上，双分子脂质膜与水层交替排列形成层脂质体，如图巧）所示。在缓冲液中，可组成多层脂质体；具有特定尺寸（１００－....

图１．?７树枝状分于体内递送过程??Ｆｉｇｕｒｅ?１．７?Ｄｅｎｄｒｉｍｅｒｓ?ｄｅｌｉｖｅｒｙ?ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｃｅｌｌ??

为了提高血液流动过程中环境的稳定性，Ｔａｒａｔｕｌａ提出用一个带有二硫键的树枝状分子与??与ＳｉＲＮＡ组装形成纳米粒子进入细胞，细胞质中的还原物质谷脱甘肤的存在能够使二硫链还??原，进而使ＳｉＲＮＡ在範细胞质内释放。如图１．７所示，裸露的ｓｉＲＮＡ?（Ａ’）经过内吞作用进入?？?....

本文编号：3982291