基于纳米容器的肿瘤标志物检测方法研究

发布时间：2018-01-07 11:03

本文关键词：基于纳米容器的肿瘤标志物检测方法研究　出处：《青岛科技大学》2015年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：第一部分在癌细胞的生长繁殖过程中,细胞内的ATP的含量会发生明显变化,另外,细胞死亡过程中,ATP的合成受到抑制,细胞中ATP的含量迅速降低。研究细胞内ATP的含量,对于了解癌细胞病变程度和细胞的新陈代谢状态具有重要意义。本实验用还原三氟乙酸银法制备了银纳米立方体,并通过银纳米立方体合成了中空、壁薄的金纳米容器并用透射电子显微镜(TEM)、紫外分光光度计(UV)对其进行了初步表征。根据TEM照片显示金纳米容器粒径在30-40 nm；利用DNA杂交技术将金纳米容器和金纳米粒子组装成DNA生物传感器,然后通过检测ATP置换下来的引物链的量检测ATP浓度,并利用核酸外切酶循环放大技术实现了信号放大。在实验的最佳条件下,对不同浓度的ATP进行测定,得到ATP的检测线性范围：1.0×10-9～1.0×10-7mol/L,检测限：8.8×10-10mol/L(3σ)。实验还对Hela细胞提取液中的ATP进行测定,结果为3.27×10-6mol/L。第二部分采用合成的新型电化学探针检测巯基化合物。通过优化实验确定检测GSH的最佳检测条件为,0.2 mol/L B-R缓冲溶液(pH 2.0)中反应20 min。在此条件下,检测线性范围为1.0×10-10～1.0×10-9mol/L,检测限达1.0×10-10mol/L (3σ, n=11)。另外,通过差示脉冲伏安法(DPV)我们检测了探针对金属硫因蛋白(MT)及谷胱甘肽还原酶(GR)的电化学响应。比较了探针对蛋白巯基(MT)和非蛋白巯基(GSH)电化学检测的灵敏度,DPV分析结果表明,TTF-BBSD对MT的响应明显高于GSH,即探针对蛋白巯基的响应更灵敏。
[Abstract]:In the first part , the ATP content in the cells was significantly changed during the growth and propagation of cancer cells . The ATP content in the cells was significantly decreased in the process of cell death . The results showed that the size of ATP in the cells was 30 - 40 nm . The detection limit was 3.8 脳 10 - 10 mol / L ( pH 2.0 ) . Under the optimum conditions , the detection limit was 1.0 脳 10 - 10 ~ 1.0 脳 10 - 9mol / L . The detection limit was 1.0 脳 10 - 10 mol / L ( 3蟽 , n = 11 ) . In addition , the electrochemical response of probe to MT and glutathione reductase ( GR ) was detected by differential pulse voltammetry ( DPV ) . The sensitivity of probe to protein sulfhydryl ( MT ) and non - protein sulfhydryl ( GSH ) electrochemical detection was compared . The results of DPV analysis showed that the response of the probe to MT was significantly higher than that of GSH , that is , the response of probe to sulfhydryl group was more sensitive .

【学位授予单位】：青岛科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R730.4;TB383.1

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