基于CuS纳米粒子阳离子交换反应的DNA生物传感器的应用研究
本文关键词：基于CuS纳米粒子阳离子交换反应的DNA生物传感器的应用研究 出处：《青岛科技大学》2015年硕士论文 论文类型：学位论文
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【摘要】：金属离子的纳米粒子通常具有相对较大的比表面积,这使得基于其量子点的阳离子交换反应可以在室温条件下快速反应完全,此过程无需酶以及其他催化剂的参与,并且可以在较短的时间内释放出大量的金属阳离子。本课题利用CuS纳米粒子与AgNO3反应,短时间内释放出大量的Cu2+的过程,将其与DNA生物传感器技术结合,对DNA, MicroRNAs,单碱基错配DNA以及DNA甲基转移酶进行了检测。因为DNA技术对信号的放大有多种方式,因此被广泛用在分析化学领域。阳离子交换技术的放大作用已广泛应用于荧光检测,本课题中分别将其应用化学发光检测以及纳米金的可视化检测。1.将阳离子交换技术与化学发光技术结合,用于DNA以及MicroRNAs的检测。在最佳实验条件下,当待测DNA的浓度范围为5.0×10-14-1.0×10-11 M的范围时,以及目标MicroRNAs的浓度为6.0×10-16～5.0×10-11M的范围时,检测结果具有较好的线性。对不同碱基序列的miRNA进行检发现,此法具有良好的特异性；对293T细胞样品的检测,检验了这种方法的实用性。2.将阳离子交换技术与纳米金聚沉引起的可视反应结合,用于单碱基错配的DNA以及DNA甲基转移酶的检测。在单碱基错配DNA浓度为1.0×10-10～1.0 x10-8 M范围内,可以用肉眼观察区分,通过对其紫外吸收的检测,发现检测结果具有良好线性；在甲基转移酶的检测中,肉眼能够区分的甲基转移酶的量为5～120U·mL-1,通过对其紫外吸收的检测,依然可以得到良好的线性。此具有法简单,灵敏度高,检测迅速等优点。利用这种方法进行目标的比色分析,仅用肉眼就可以实现样品的定性分析。
[Abstract]:Metal ion nanoparticles usually have a relatively large specific surface area, which makes the cationic exchange reaction based on their quantum dots complete at room temperature. This process does not require the participation of enzymes and other catalysts, and can release a large number of metal cations in a relatively short time. In this study, CuS nanoparticles were used to react with AgNO3. A large amount of Cu2 was released in a short time and combined with DNA biosensor technology. Single base mismatch DNA and DNA methyltransferase were detected because DNA technology amplifies signals in many ways. Therefore, it has been widely used in analytical chemistry. The amplification of cation exchange technology has been widely used in fluorescence detection. In this paper, the application of chemiluminescence detection and nano-gold visualization detection. 1. The cation exchange technology and chemiluminescence technology are combined. Under the optimum experimental conditions, when the concentration range of DNA to be tested is 5.0 脳 10 ~ (-14) to 1.0 脳 10 ~ (-11) M. And when the concentration of target MicroRNAs is 6.0 脳 10 ~ (-16) M, 5.0 脳 10 ~ (-11) M. The detection results showed good linearity. The miRNA of different base sequences was found to have good specificity. The practicability of this method was tested for 293T cell samples. 2. The cationic exchange technique was combined with the visible reaction induced by gold nanoparticles. It was used for the detection of DNA and DNA methyltransferase in the range of 1.0 脳 10 ~ (-10) ~ (10) ~ (-1) 脳 10 ~ (-8) M for single base mismatch DNA in the range of 1.0 脳 10 ~ (-10) ~ 10 ~ (-1) M. It can be observed and distinguished by naked eye. The detection of ultraviolet absorption shows that the detection results have good linearity. In the detection of methyltransferase, the amount of methyltransferase that can be distinguished by naked eye is 5 ~ 120U 路ml ~ (-1). By using this method, the qualitative analysis of the sample can be realized only with the naked eye.
【学位授予单位】：青岛科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：TB383.1;TP212.3
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，本文编号：1438937
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