磁性纳米微球的制备以及其应用在α-乙酰乳酸脱羧酶的固定
发布时间:2018-05-30 08:49
本文选题:四氧化三铁 + 溶胶-凝胶 ; 参考:《大连工业大学》2015年硕士论文
【摘要】:在本研究中,一种具有灵活使用性的Fe3O4@SiO2 NH2纳米微球成功被合成。使用羰基二咪唑(CDI)作为一种螯合交联剂,将α-乙酰乳酸脱羧酶(α-ALDC)成功的固定在这种核壳纳米微球上。首先,单分散性、具有亲水的性质的、单晶型、平均直径100 nm左右的Fe3O4磁性纳米粒子通过先前报导过的溶剂热还原方法(加上一点小的修饰)制备得到。第二步,通过溶胶-凝胶技术,正硅酸乙酯(TEOS)用来引入高活性的硅醇到磁性Fe3O4的纳米微球的表面。第三步,氨基功能化的核壳Fe3O4磁纳米粒子是通过氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)与Fe3O4@SiO2 OH结构纳米粒子表面的羟基通过极性化学键连接所得。然后,以CDI作为一种螯合交联剂,α-ALDC是成功地被固定在氨基功能化的Fe3O4磁性纳米粒子上。影响α-ALDC固定在氨基功能化的Fe3O4表面的因素和固定化的α-ALDC的性质被详细的进行分析。制备得到的Fe3O4、Fe3O4@SiO2 OH、Fe3O4@Si O2 NH2磁性纳米粒子通过扫描电镜(SEM),透射电镜(TEM),X-射线衍射(XRD),傅里叶红外光谱(FT-IR)来进行定性分析。测试结果表明合成的纳米粒子具有令人满意的磁性,良好的亲水性,高度的结晶性,并且有大量的氨基基团在纳米粒子上。固定在氨基Fe3O4磁纳米粒子上的α-ALDC的载量被检测出是48.70±1.25μg/mg。与游离的α-ALDC相比较,固定的α-ALDC展示出良好的热稳定性和pH稳定性。尽管与游离的α-ALDC相比较,固定的α-ALDC的Vmax有所减小,Km值有所增加,但是这两个动力学参数的改变是相当的接近,这表明固定的α-ALDC仍然具有良好的催化能力。在储存14天后,与固定化的酶的活力相比,固定的α-ALDC仍然具有65.35%的活力。然而在相同的条件下,游离的α-ALDC只保存了它起初活力的39.22%。在8次的连续使用后,固定的α-ALDC的剩余活力仍然保持在它起初活力的67.47%。因此,这种固定α-ALDC的方式在实际应用方面展示出潜在的价值。
[Abstract]:鍦ㄦ湰鐮旂┒涓,
本文编号:1954681
本文链接:https://www.wllwen.com/kejilunwen/cailiaohuaxuelunwen/1954681.html