跨膜功能化阳离子型凝胶多糖纳米基因载体的制备及性质研究

发布时间：2020-05-11 16:03

【摘要】：在基因治疗过程中构建安全性高、转染率高的基因递送载体是实现基因治疗的前提和关键。凝胶多糖作为一种天然多糖,除了具有许多优良的生物性能外,由于主链上具有大量的反应活性基团,我们可以据此进行化学修饰来制备各种具有生物功能的多糖衍生物,因而凝胶多糖在生物医药研究领域日益受到人们的关注。本文首先通过“click”反应对凝胶多糖进行化学改性,制备了水溶性好的多氨基化凝胶多糖(Cur-PLG),进一步分别用适量的乳糖酸(lactobionic acid,Lac)和尿刊酸(urocanic acid,UA)对氨基凝胶多糖做化学修饰,合成了两种新型的凝胶多糖衍生物(Cur-Lac和Cur-UA)。合成化合物的结构分别通过红外(FTIR)、核磁共振氢谱(~1H NMR)和核磁共振碳谱(~(13)CNMR)进行确证,分子量利用GPC进行测定,在PBS缓冲溶液里所合成化合物粒子的形态和大小采用扫描电子显微镜和动态光散射进行测定。所合成的两种衍生物的细胞毒性、负氢能力和结合DNA的能力依次通过MTT法、酸碱滴定和凝胶电泳实验一一进行测定。研究结果表明不同取代度的乳糖酸功能化阳离子凝胶多糖纳米粒子(Cur-Lac5%Cur-Lac15%和Cur-Lac20%)平均粒径在200nm左右,而低取代度的尿刊酸修饰阳离子凝胶多糖纳米粒子(Cur-UA5%和Cur-UA10%)平均粒径小于100nm,Cur-Lac和Cur-UA纳米粒子在合适的N/P条件下都能很好地结合DNA,并具有较好的负载氢质子的能力。综合而言,本论文合成了两类具有跨膜功能的凝胶多糖基因载体,该载体具有体内外递送基因的潜力。研究结果为开发基于凝胶多糖的新型纳米基因载体提供了先进的方法和有益的参考。
【图文】：

功能化,基因,非病毒载体,载体

图 1.1 功能化纳米载体的基因递送Fig 1.1 functionalized nanocarriers for gene delivery体可以大致分为两类，一类为病毒载体，另一类为非病毒载体。鉴于转染率，基因治疗发展的早期人们大多利用病毒（如逆转录病毒，载体。由于病毒本身存在潜在的致癌性、免疫原性、广泛的组织亲力以及制备困难等因素，病毒性载体的应用受到了极大的限制。与较高的基因负载量和易于制备的特点，因而人们越来越注重开发应毒载体的开发已取得了相当的进展，人们利用物理、化学和其他方无机或有机的非病毒基因载体。非病毒载体需要具有如下5个要素[致密的 DNA 复合物以保护 DNA 免于核酸酶和其他血液成分的影

脂质体

图 1.2 脂质体Fig 1.2 Chemical structure尤其值得提出的是脂质体在递送 siRNA 的明，一类基于脂质的 siRNA 载体经临床评价为过对粒径小于 200nm 的 DNA 递送载体和包封后，确定了此 SNALP 的组成[28]。首例用于递以乙型肝炎小鼠为动物模型，递送 siRNA 的靶纳米载体都能有效运载核酸进入肝细胞，且在疾病相关的基因。一些 SNALP 在体内递送 siR细胞对粒子的内化作用[30]。据报道，脂质体纳pKa 值相关，，较弱碱性的阳离子脂质（pKa～而，也有研究发现成分确定的具有较高的 pKa
【学位授予单位】：内蒙古大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：TB383.1;O629.12

【参考文献】