病毒纳米材料的生物制备与研究

发布时间：2020-05-24 00:40

【摘要】：随着纳米科技的飞速发展,特别是对自组装纳米技术的研究,极大地推动了材料、化学、生物医学等领域的快速进步。近年来,癌症已经成为医学领域研究的热点,从而促使许多生物化学方面的研究者去开发越来越多的生物纳米材料作为药物或者基因的载体,用于癌症的治疗与研究中。在众多的生物纳米材料里,病毒因其生物相容性好、便于大量制备、易于通过分子生物学进行改造等特点引起了极大的关注,烟草花叶病毒便是其中之一。本课题充分利用烟草花叶病毒的这种优势,对其外表面进行了多肽修饰,在赋予其靶向功能的同时也使得它以稳定的盘状结构存在,并对这种修饰进行了简单的探索与研究。本课题基于已经报道的对于烟草花叶病毒的修饰的研究,结合病毒本身棒状特性以及自组装特点,以烟草花叶病毒外壳蛋白为研究对象,先对其进行修饰,然后诱导其自组装,成功将其控制在盘状结构状态,并具有靶向功能。本课题首先获得了烟草花叶病毒外壳蛋白的基因,利用生物化学中的基因工程技术,通过PCR突变,分别在蛋白的3号位以及C端引入半胱氨酸和RGD多肽。利用高速离心、琼脂糖凝胶电泳、SDS聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)、快速蛋白液相色谱(HPLC)、透析、透射电子显微镜(TEM)等试验设备对蛋白进行了纯化,并诱导蛋白进行了自组装,通过改变pH和离子浓度对其组装情况进行了分析。虽然在烟草花叶病毒的最佳组装条件pH=5.5时,可以看到棒状结构,但是这种结构是以堆积的形式排列的,并不是真正意义上的病毒结构,在5.5pH6.0、离子强度100m M的条件下,可以清楚的观察到组装体几乎全部以纳米盘状结构存在。因此,通过引入功能性多肽,利用多肽所产生的位阻效应,成功得到了一种具有靶向功能的盘状纳米材料。
【学位授予单位】：东北石油大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：TB383.1

【参考文献】