纳米银诱导的斑马鱼脑组织神经毒性效应研究

发布时间：2020-12-21 12:01

　　纳米银（AgNPs）由于其独特的抗菌性能在许多领域得到了广泛的应用。随着AgNPs生产和应用的增加,人们越来越关注其生态与健康风险。已有研究证明,AgNPs会对生物的多种系统及其功能产生影响。但关于AgNPs对生物神经系统方面的影响的报道却比较少,AgNPs的神经毒性效应及机制有待深入研究。为了探究AgNPs对斑马鱼（Danio rerio）的神经毒性效应及机制,本文根据相关文献和AgNPs对斑马鱼96 h半致死浓度（283.13μg/L）,设置暴露浓度为0、50和100μg/L,在暴露30天后剖取斑马鱼脑组织进行相关研究。首先,通过电感耦合等离子体质谱仪（ICP-MS）和H.E染色法检测脑组织中的Ag⁺含量及其引起的组织结构损伤。然后,通过分析抗氧化酶活性（T-SOD和CAT）和炎性因子相关基因（il-1β、il-8、il-6和tnf-α）mRNA表达量探讨AgNPs诱导的神经毒性效应。最后,通过评价神经递质γ-氨基丁酸（GABA）的含量、分析GABA代谢通路关键基因（gabra1、gat1、abat和gad1）和癫痫标志物c-fos基因的mRNA表达,探究GA... 

【文章来源】：山西大学山西省

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

本论文的总体研究方案

第二章 Ag NPs 暴露对斑马鱼脑组织结构的损伤在 30 mg 斑马鱼脑组织中加入 300 μL HNO3 和 H2O2（3:1）混合溶液，于 90 ℃消解 6 h，定容到 1 mL，通过日本岛津 2030 型 ICP-MS 检测 Ag 含量，以铟（In）元素为内标。2.4.3 组织病理学分析暴露结束后，通过石蜡切片观察斑马鱼脑组织形态。具体步骤如图 2.1 所示：

第二章AgNPs暴露对斑马鱼脑组织结构的损伤15图2.2不同浓度AgNPs处理对斑马鱼脑组织结构的影响（×400）白色方框：炎性浸润；三角形：空泡化；红色箭头：血栓Figure2.2EffectofAgNPsexposureonhistopathologicalstructureofbraininzebrafish(×400)Whitebox:Inflammatorycells,Triangle:Cavitation,Redarrow:Thrombus4讨论AgNPs进入生物体是其产生毒性效应的前提，因此评价AgNPs的神经毒性效应时，研究其在脑组织的累积量至关重要[108]。科学研究中，常见的AgNPs暴露方式包括静脉注射、皮肤接触、口服和滴鼻等。但不管是何种暴露方式，脑组织都是其靶向性累积的组织之一。已有研究显示，皮下注射的AgNP可进入大鼠的脑部，并以纳米颗粒的形式在神经元细胞中累积[112]。在鱼类的研究中也得到了相似的结果。低浓度（10μg/L）AgNPs暴露日本青鳉（Oryziaslatipes）2天，脑组织中的Ag浓度较高，达到1.5μg/g[111]。PVP包被、粒径约为10nmAgNPs暴露麦穗鱼（Pseudorasboraparva）10天，脑组织中的Ag浓度比鳃、肠和肌肉中的高[113]。本研究采用PVP包被、粒径为20nmAgNPs暴露斑马鱼30天，剖取脑组织进行分析，研究结果同样表明，AgNPs可进入斑马鱼脑组织，且AgNPs处理组中的Ag积累量呈剂量依赖性增加。斑马鱼虽是低等的脊椎动物，但其结构和功能与哺乳动物类似，遗传信息与人


本文编号：2929792