基于肽和介孔硅复合材料的水解酶模拟物的研究
发布时间：2021-01-30 00:54
为通过化学方法合成一种天然酶的模拟物以克服天然酶存在的一些固有的缺陷,本实验以六大酶类中的丝氨酸水解酶类作为要模拟的对象,以较简单的显色底物对硝基苯酚乙酸酯作为该模拟酶的催化底物,通过控制变量法分别考察了不同的温度、pH值、底物浓度、复合材料的浓度对催化活性的影响。天然水解酶的活性中心一般含有直接参与催化过程的催化基团（催化三联体（S、H、E/D））和与底物结合的结合基团,并且这些氨基酸残基通过肽链的盘曲折叠在空间上相互靠近。但也有研究表明在小肽序列中引入水解酶催化三联体三个催化基团之一的组氨酸时,小肽自组装形成纤维也能起到催化作用。本实验通过研究将含催化基团组氨酸（H）的和结合基团色氨酸（W）的小肽连接到介孔硅纳米材料表面来模拟水解酶,对比不同复合材料的催化活性,得到最理想的模拟酶模拟物并测定其催化效果最好时的反应条件。首先合成介孔硅并进行氨基化,然后利用EDC/NHS方法将小肽的羧基与介孔硅表面氨基耦连生成酰胺键,从而将小肽固定到介孔硅上,并进行了连接效率的优化,得到在0.03 MEDC,pH 6.5,EDC:NHS:Peptide-COOH=30:10:1条件下反应24 h时的连...
【文章来源】：天津科技大学天津市
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
一，质子转移示意图阅
?Ｓｕｒｆａｃｅ?ｃｈａｒｇｅ?ｔｕｎｉｎｇ???Ｐｅｐｔｉｄｅｓ??图１－２介孔硅装载药物和复合生物分子／其它材料的示意图１１２６１??Ｆｉｇｕｒｅ?１－２?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｍｅｓｏｐｏｒｏｕｓ?ｓｉｌｉｃａ?ｌｏａｄｉｎｇ?ｄｒｕｇｓ?ａｎｄ?ｂｉｎｄｉｎｇ?ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ／ｃｏｍｐｏｓｉｔｅｓ．??１．４肽??肽是由两个或多个氨基酸通过一个氨基酸的氨基与另一个氨基酸的羧基结合而??成的化合物。是机体完成各种复杂的生理活性必不可少的参与者。所有细胞都能合成??多肽物质，其功能活动也受多肽的调节。它涉及激素、祌经、细胞生长和生殖各领域，??其重要性在于调节体内各个系统器官和细胞。分子量在１０？５０之间的称为小肽、寡??肽、低聚肽，２？１０肽属于讳肽，１０？５０肽属于多肽。??１．５氨基与羧基耦连反应??生物分子例如Ｉ）ＮＡ和抗体可以通过两种方式固定在纳米颗粒表面：物理吸附或??共价连接。共价连接的方法因其生物耦连过程的稳定性和特异性而更合适。巯坫，氨??基和羧基功能基团是表面修饰的关键基团，而氨基是最常用的。在纳米颗粒表而引入??氨基的方法一种是“一步法”。另一种方法是“两步法”，在介孔．氧化硅形成后加入３－??氨丙基三乙氧基硅烷。介孔二氧化硅与识别分子之间可以使州耦合剂ＥＤＣ／ＮＨＳ形成??稳定的酰胺键。??本实验过程中采取“两步法”两步法，小肽丨：游离的羧基与ＥＤＣ反应生成不??稳定的中间产物〇?—酰基脲
?５００??温度（°Ｃ）??图３－３介孔硅、氨基化的介孔硅、肽－介孔硅复合材料的热解重量分析曲线??Ｆｉｇｕｒｅ３－３?Ｔｈｅ?Ｔｈｅｒｍｏｇｒａｖｉｍｅｔｒｉｃ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ＭＳＮｓｘ?ＭＳＮ－ＮＨ２?ａｎｄ?ＭＳＮ－ＮＨ２／Ｐｅｐｔｉｄｅ．??２０??
【参考文献】：
期刊论文
[1]基于EDC/sulfo-NHS的羧基化SPIO表面抗体耦联[J]. 刘琳,张小强,张宇,浦跃朴,尹立红,刘卉,徐靓,杨文倩,徐春雨. 南京医科大学学报(自然科学版). 2013(04)
硕士论文
[1]功能介孔二氧化硅材料的制备、表征及应用[D]. 周黄歆.广西师范大学 2014
本文编号：3007923
【文章来源】：天津科技大学天津市
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
一，质子转移示意图阅
?Ｓｕｒｆａｃｅ?ｃｈａｒｇｅ?ｔｕｎｉｎｇ???Ｐｅｐｔｉｄｅｓ??图１－２介孔硅装载药物和复合生物分子／其它材料的示意图１１２６１??Ｆｉｇｕｒｅ?１－２?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｍｅｓｏｐｏｒｏｕｓ?ｓｉｌｉｃａ?ｌｏａｄｉｎｇ?ｄｒｕｇｓ?ａｎｄ?ｂｉｎｄｉｎｇ?ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ／ｃｏｍｐｏｓｉｔｅｓ．??１．４肽??肽是由两个或多个氨基酸通过一个氨基酸的氨基与另一个氨基酸的羧基结合而??成的化合物。是机体完成各种复杂的生理活性必不可少的参与者。所有细胞都能合成??多肽物质，其功能活动也受多肽的调节。它涉及激素、祌经、细胞生长和生殖各领域，??其重要性在于调节体内各个系统器官和细胞。分子量在１０？５０之间的称为小肽、寡??肽、低聚肽，２？１０肽属于讳肽，１０？５０肽属于多肽。??１．５氨基与羧基耦连反应??生物分子例如Ｉ）ＮＡ和抗体可以通过两种方式固定在纳米颗粒表面：物理吸附或??共价连接。共价连接的方法因其生物耦连过程的稳定性和特异性而更合适。巯坫，氨??基和羧基功能基团是表面修饰的关键基团，而氨基是最常用的。在纳米颗粒表而引入??氨基的方法一种是“一步法”。另一种方法是“两步法”，在介孔．氧化硅形成后加入３－??氨丙基三乙氧基硅烷。介孔二氧化硅与识别分子之间可以使州耦合剂ＥＤＣ／ＮＨＳ形成??稳定的酰胺键。??本实验过程中采取“两步法”两步法，小肽丨：游离的羧基与ＥＤＣ反应生成不??稳定的中间产物〇?—酰基脲
?５００??温度（°Ｃ）??图３－３介孔硅、氨基化的介孔硅、肽－介孔硅复合材料的热解重量分析曲线??Ｆｉｇｕｒｅ３－３?Ｔｈｅ?Ｔｈｅｒｍｏｇｒａｖｉｍｅｔｒｉｃ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ＭＳＮｓｘ?ＭＳＮ－ＮＨ２?ａｎｄ?ＭＳＮ－ＮＨ２／Ｐｅｐｔｉｄｅ．??２０??
【参考文献】：
期刊论文
[1]基于EDC/sulfo-NHS的羧基化SPIO表面抗体耦联[J]. 刘琳,张小强,张宇,浦跃朴,尹立红,刘卉,徐靓,杨文倩,徐春雨. 南京医科大学学报(自然科学版). 2013(04)
硕士论文
[1]功能介孔二氧化硅材料的制备、表征及应用[D]. 周黄歆.广西师范大学 2014
本文编号：3007923
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