阳离子化荧光金纳米簇的合成及siRNA递送研究

发布时间：2021-03-09 10:57

　　基于Small interfering RNA（siRNA）的RNA干扰（RNA interference, RNAi）策略已经成为生物医学研究的常规手段,而通常采用的基于聚阳离子或阳离子磷脂的siRNA递送系统递送效率低、细胞毒性高,而且缺少示踪功能,严重制约了siRNA药物临床转化。为克服传统siRNA递送载体的不足,本研究发展了一种新型siRNA荧光纳米递送系统。首先利用牛血清白蛋白为模板,通过生物矿化策略合成具有近红外荧光发射的金纳米簇（Gold nanocluster, GN）,利用乙二胺（Ethylenediamine, EDA）或N,N-二甲基乙二胺（N,N’-Dimethylethylenediamine, DMA）对GN进行共价修饰,得到阳离子化金纳米簇（Cationic gold nanocluster, CGN）,同时实现siRNA高效递送和荧光示踪。然后,以表达绿色荧光蛋白（Green fluorescence protein, GFP）的肺癌A549细胞（A549-GFP）为细胞模型,验证了CGN可实现siRNA高效递送,并沉默A549-GFP细胞的GFP表达... 

【文章来源】：分析化学. 2020,48(06)北大核心

【文章页数】：9 页

【部分图文】：

GN、DMA-GN和EDA-GN的凝胶电泳图

GN、DMA-GN和EDA-GN的细胞毒性

蛋白质保护的GN生物相容性良好, 荧光性质稳定, 荧光发射波长可调, 而且可发射近红外荧光[39,40]。基于此, 本研究利用BSA生物矿化合成的GN进行阳离子化修饰, 并用作siRNA的递送载体。阳离子化的GN(DMA/EDA-GN)的制备过程及对siRNA的递送原理如图1所示。在碱性条件下, 以BSA为模板时, HAuCl4被还原, 合成可发射近红外荧光的GN[27]。在EDC/NHS的活化作用下, EDA或DMA能与GN表面BSA上的谷氨酸等残基反应, 使BSA-GN阳离子化。siRNA呈负电性, 即可通过静电作用吸附在CGN表面, 从而实现对siRNA的有效负载。负载了siRNA的纳米复合物进入细胞后, 细胞内的酸性pH环境使EDA或DMA上的胺基质子化, 产生“质子海绵”效应[34～37], 破环内涵体, 释放siRNA, 有效沉默靶基因。3.2 DMA/EDA-GN复合物的表征


本文编号：3072744