透明质酸水凝胶装载Hep/PLL-VEGF纳米粒子的制备及对内皮细胞的影响

发布时间：2021-07-19 14:57

　　冠心病作为常见的心血管疾病之一,已经严重威胁着人类身心健康。目前,心血管疾病治疗的方法主要有冠脉搭桥术、药物疗法和介入治疗。介入治疗创伤小,是心血管疾病的主要治疗方法。血管支架虽然解决了许多临床上的问题,但仍存在着支架材料生物相容性不足和引起血管损伤,从而造成再狭窄和晚期血栓等问题。目前,在支架材料表面构建多功能仿生涂层并实现快速内皮化是解决再狭窄和晚期血栓最有效途径之一。水凝胶的三维构造与细胞外基质类似,有利于微环境的构建。此外,水凝胶可以设计成随时间降解的生物材料,有利于控制血管内膜形成过程。本研究将不同浓度的多巴胺与一定浓度透明质酸制成HA-DAP水凝胶,通过一系列的材料学表征及细胞相容性评价,筛选出最优的HA-DAP水凝胶;然后对比研究两种方式装载VEGF（直接加入水凝胶中HA-DAP3-V、通过Hep/PLL纳米粒子载入HA-DAP3-NP10V）,考察两种方式下对VEGF释放情况和内皮细胞的影响。在酸性条件下,用1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺（EDC）和N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）活化透明质酸羧基,再与多巴胺上氨基反应生成酰胺键,将多巴胺接枝到透明质酸上,然后将... 

【文章来源】：西南交通大学四川省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第1章 绪论
    1.1 生物医用水凝胶
        1.1.1 水凝胶的定义与分类
        1.1.2 纳米复合水凝胶的定义和研究现状
    1.2 透明质酸水凝胶
        1.2.1 透明质酸水凝胶的制备
        1.2.2 透明质酸水凝胶的研究现状
    1.3 纳米粒子在生物医学材料中的应用
        1.3.1 纳米粒子材料研究现状
        1.3.2 肝素基纳米粒子的应用
    1.4 心血管材料表面诱导内皮化研究
        1.4.1 内皮细胞和内皮祖细胞
        1.4.2 诱导内皮化研究现状
    1.5 论文的目的与意义、主要研究内容及技术路线
        1.5.1 论文的目的与意义
        1.5.2 论文主要研究内容
        1.5.3 技术路线
第2章 HA-DAP水凝胶的制备、表征与细胞相容性评价
    2.1 引言
    2.2 HA-DAP水凝胶成胶机理
        2.2.1 透明质酸分子量的选择
        2.2.2 成胶机理
    2.3 不同浓度多巴胺HA-DAP水凝胶的制备
        2.3.1 主要试剂
        2.3.2 配置试剂
        2.3.3 实验仪器
        2.3.4 HA-DAP水凝胶的制备
    2.4 HA-DAP水凝胶的表征及结果
        2.4.1 HA-DAP衍生物的表征
        2.4.2 水凝胶的形貌
        2.4.3 水凝胶溶胀率
    2.5 不同多巴胺浓度制得的HA-DAP水凝胶的细胞相容性
        2.5.1 内皮细胞粘附行为评价(2小时)
        2.5.2 内皮细胞静态培养1天、3天
    2.6 讨论
        2.6.1 不同多巴胺反应浓度对HA-DAP水凝胶性能的影响
        2.6.2 不同多巴胺反应浓度对HA-DAP水凝胶细胞相容性的影响
    2.7 本章小结
第3章 HA-DAP水凝胶装载肝素/多聚赖氨酸纳米粒子的表征和细胞相容性评价
    3.1 引言
    3.2 HA-DAP水凝胶装载肝素/多聚赖氨酸纳米粒子的制备
        3.2.1 实验试剂
        3.2.2 实验试剂配置
        3.2.3 实验仪器
        3.2.4 不同纳米粒子含量HA-DAP-NP的制备
    3.3 HA-DAP3-NP的表面形貌
        3.3.1 不同纳米粒子含量HA-DAP3-NP的表面形貌
        3.3.2 HA-DAP3-NP10的断面形貌
    3.4 HA-DAP3-NP10细胞相容性评价
        3.4.1 HA-DAP3-NP10内皮细胞增殖行为评价
        3.4.2 HA-DAP3-NP10内皮细胞迁移能力评价
    3.5 本章小结
第4章 HA-DAP水凝胶中加入载VEGF的肝素/多聚赖氨酸纳米粒子的研究
    4.1 HA-DAP水凝胶中加入载VEGF的肝素/多聚赖氨酸纳米粒子
        4.1.1 引言
        4.1.2 实验试剂
        4.1.3 实验仪器
        4.1.4 凝胶构建
    4.2 HA-DAP-NPV生长因子释放曲线
        4.2.1 生长因子释放实验步骤
        4.2.2 生长因子释放结果
    4.3 细胞相容性评价
        4.3.1 内皮细胞增殖行为评价
        4.3.2 促内皮细胞迁移能力评价
        4.3.3 内皮细胞在HA-DAP3-NP10V内部的形态
    4.4 讨论
        4.4.1 HA-DAP3-NP10V和HA-DAP3-V释放VEGF的对比研究
        4.4.2 HA-DAP3-NP10V和HA-DAP3-V细胞相容性对比研究
    4.5 本章小结
结论
致谢
参考文献
攻读硕士学位期间发表的论文及科研成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]不同浓度透明质酸水凝胶的细胞相容性[J]. 李凯,吕少一,周建业,商青青,邵自强,胡盛寿.  中国组织工程研究. 2013(16)
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[3]不同相对分子量透明质酸功能及应用的研究[J]. 黄岳山,潘艺茗,薛静.  透析与人工器官. 2010(04)
[4]量子点在肿瘤研究中的应用[J]. 陈良冬,李雁,袁宏银,庞代文.  癌症. 2006(05)
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[6]血管内支架和支架内皮化[J]. 赵宏伟,王贵学,戴传云.  生物技术通讯. 2005(06)
[7]包载治疗基因的聚合物纳米粒子:I.纳米粒子制备及动物模型基因治疗实验研究[J]. 杨菁,宋存先,孙洪范,武莉,唐丽娜,冷希岗,王彭延,徐意瑶,李拥军,管珩.  生物医学工程学杂志. 2005(03)
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[10]用于癌症治疗的纳米磁性载体材料研究进展[J]. 张晓金,原续波,胡云霞,常津.  北京生物医学工程. 2003(04)

博士论文
[1]Ti表面固定层粘连蛋白/肝素/SDF-1α以构建抗凝及诱导内皮再生微环境的研究[D]. 刘涛.西南交通大学 2014

硕士论文
[1]透明质酸的改性及功能化[D]. 王娟勤.江南大学 2013
[2][D].



本文编号：3290904