纳米材料标记的侧流层析生物传感器的设计和应用
发布时间：2021-08-24 20:43
侧流层析检测技术（LFSB）改善了传统检测技术中步骤复杂、成本高昂、耗费时间等问题,为目标物的快速、精准、即时检测提供了一个良好的选择与分析平台,并广泛的应用于生物化学、农业、食品与环境安全领域。但是层析检测技术仍存在需要改进与优化的方面,如缺少对某些癌症标记物的检测,检测的灵敏度需要进一步的提升,使用简便性有进一步简化的必要等等。本论文将致力于通过改进纳米粒子标记物和制备新型的层析检测试纸来解决以上存在的问题。本论文主要研究内容包括以下五个部分:1、基于Y形DNA和目标物循环放大的侧流层析生物传感器对miRNA三线检测。本文开发了一种基于目标循环放大和LFSB的可视、灵敏和准确的检测miRNA的简单策略。利用Y形DNA探针,本研究将易生物降解的miRNA转化为LFSB上成熟的DNA检测。和两线的LFSB相比,三线的LFSB提供了逻辑判断和更令人信服的结果。在最优条件下,溶液中miR-16的可视定性检测限为0.1pM,检测范围为0.0001-10nM。系统显示了对完全互补目标物和错配对链的很好的特异性识别能力。并且,在不需要复杂的纯化和分离过程的前提下,本研究在HeLa细胞裂解液中成功...
【文章来源】：北京科技大学北京市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：127 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２．１?（Ａ）基于试纸条的ＬＦＢ的一般方案
物标志物亚硝酸根离子和尿酸的检测，实验结果证明了棉线是用于横向流动??装置的合适材料［５３】。Ｗｈｉｔｅｓｉｄｅｓ等设计了三种基于棉线的测定法，“编织阵??列”，“分支设计”，“缝制阵列”，并通过检测五种不同的分析物（图２．２Ａ）??展示了基于棉线设备的检测功能。棉线被编织在织机上以达到进行平行的多??个测定的目的，或通过疏水性聚合物片缝合将测定结合到绷带式的系统中，??这证明了棉线能够并行多个测定［５４】。之后不久，Ｊｕｎｃｋｅｒ等将棉线免疫色谱??测定引入到盒式系统中，使其适合多重检测（图２．２Ｂ），得到Ｃ反应蛋白??（ＣＲＰ）的检测限为３７７?ｐＭ＾。使用ＣＲＰ、骨桥蛋白和瘦素蛋白的三种抗??体处理打结线，证实了多重检测的可能性。之后，Ｍａｏ等在棉线上使用不同??纳米粒子和纳米复合材料为标记物做了几项工作
人铁蛋白［５８］。他们还在棉线上引入碳纳米管（ＣＮＴ）?［５９］和碳纳米管／金纳米??颗粒（ＣＮＴ／ＧＮＰ）纳米复合材料＿作为标记物，检测限比ＧＮＰ或ＣＮＴ作??标记物的装置分别提高了?５００倍和２－３个数量级。有趣的是，图２．２Ｃ显示??了一种温度依赖型的基于棉线的ＤＮＡ生物传感器［６｜１，将含有捕获探针的液??体蜡加到棉线检测区域的两端，液体在蒸发后捕获探针浓缩到该区域，这样??相当于提高了灵敏度。??２．２．３垂直流形式和基于注射器的生物传感器??虽然ＬＦＢ最初被定义为沿着单个轴以适应试纸条样式的生物传感器，??但是也可以使用垂直流样式来操作。这种称为快速垂直流动检测（ＲＶＡ）的??替代ＬＦＢ的形式具有几个独特的优点，包括更快的分析时间和不存在“钩??效应”［６２］。因此，不少研宄者己经注意探索ＲＶＡ而不是ＬＦＡ。Ｋｉｍ等开发??了一种用于Ｃ反应蛋白（ｈｓＣＲＰ?）的快速、一步式、立式流动免疫检测（ＶＦＡ），??检测在２分钟内可以完成，检测范围为０．０１至１０?ｎｇ?ｍｌ／ｌ［６３］。ＶＦＡ传感器??通过简单地堆叠侧向流检测中使用的材料来组装。添加到样品注入孔的血清??样品将按顺序达到并润湿样品垫、结合垫、不对称膜和ＮＣ膜。与ＬＦＡ系统??相比
【参考文献】：
期刊论文
[1]p53 protein expression and CA19.9 values in differential cytological diagnosis of pancreatic cancer complicated with chronic pancreatitis and chronic pancreatitis[J]. De-Qing Mu Shu-You Peng, Department of Surgery, the Second Affiliated Hospital, Medical College of Zhe Jiang University, Hang Zhou 310009, Zhe Jiang Province, China Guo-Feng Wang, Department of Pathology, the Second Affiliated Hospital, Medical College of Zhe Jiang University, Hang Zhou 310009, Zhe Jiang Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2003(08)
本文编号：3360690
【文章来源】：北京科技大学北京市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：127 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２．１?（Ａ）基于试纸条的ＬＦＢ的一般方案
物标志物亚硝酸根离子和尿酸的检测，实验结果证明了棉线是用于横向流动??装置的合适材料［５３】。Ｗｈｉｔｅｓｉｄｅｓ等设计了三种基于棉线的测定法，“编织阵??列”，“分支设计”，“缝制阵列”，并通过检测五种不同的分析物（图２．２Ａ）??展示了基于棉线设备的检测功能。棉线被编织在织机上以达到进行平行的多??个测定的目的，或通过疏水性聚合物片缝合将测定结合到绷带式的系统中，??这证明了棉线能够并行多个测定［５４】。之后不久，Ｊｕｎｃｋｅｒ等将棉线免疫色谱??测定引入到盒式系统中，使其适合多重检测（图２．２Ｂ），得到Ｃ反应蛋白??（ＣＲＰ）的检测限为３７７?ｐＭ＾。使用ＣＲＰ、骨桥蛋白和瘦素蛋白的三种抗??体处理打结线，证实了多重检测的可能性。之后，Ｍａｏ等在棉线上使用不同??纳米粒子和纳米复合材料为标记物做了几项工作
人铁蛋白［５８］。他们还在棉线上引入碳纳米管（ＣＮＴ）?［５９］和碳纳米管／金纳米??颗粒（ＣＮＴ／ＧＮＰ）纳米复合材料＿作为标记物，检测限比ＧＮＰ或ＣＮＴ作??标记物的装置分别提高了?５００倍和２－３个数量级。有趣的是，图２．２Ｃ显示??了一种温度依赖型的基于棉线的ＤＮＡ生物传感器［６｜１，将含有捕获探针的液??体蜡加到棉线检测区域的两端，液体在蒸发后捕获探针浓缩到该区域，这样??相当于提高了灵敏度。??２．２．３垂直流形式和基于注射器的生物传感器??虽然ＬＦＢ最初被定义为沿着单个轴以适应试纸条样式的生物传感器，??但是也可以使用垂直流样式来操作。这种称为快速垂直流动检测（ＲＶＡ）的??替代ＬＦＢ的形式具有几个独特的优点，包括更快的分析时间和不存在“钩??效应”［６２］。因此，不少研宄者己经注意探索ＲＶＡ而不是ＬＦＡ。Ｋｉｍ等开发??了一种用于Ｃ反应蛋白（ｈｓＣＲＰ?）的快速、一步式、立式流动免疫检测（ＶＦＡ），??检测在２分钟内可以完成，检测范围为０．０１至１０?ｎｇ?ｍｌ／ｌ［６３］。ＶＦＡ传感器??通过简单地堆叠侧向流检测中使用的材料来组装。添加到样品注入孔的血清??样品将按顺序达到并润湿样品垫、结合垫、不对称膜和ＮＣ膜。与ＬＦＡ系统??相比
【参考文献】：
期刊论文
[1]p53 protein expression and CA19.9 values in differential cytological diagnosis of pancreatic cancer complicated with chronic pancreatitis and chronic pancreatitis[J]. De-Qing Mu Shu-You Peng, Department of Surgery, the Second Affiliated Hospital, Medical College of Zhe Jiang University, Hang Zhou 310009, Zhe Jiang Province, China Guo-Feng Wang, Department of Pathology, the Second Affiliated Hospital, Medical College of Zhe Jiang University, Hang Zhou 310009, Zhe Jiang Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2003(08)
本文编号：3360690
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