蛋白变性、纤维化的检测及其生物材料应用

发布时间：2021-11-07 00:17

　　小分子与蛋白质之间的作用已经被用于各个研究方向,可以被用来实现很多研究目的。本文借助这种特殊作用力主要是为了筛选淀粉样纤维的探针和构筑新型荧光纳米粒子。蛋白质的错误折叠导致的淀粉样结块是诱发很多相关疾病的关键因素。对于具有对淀粉样蛋白形成过程的监测功能和抑制效力的新型小分子的开发和研究是目前迫切需要的。在这项研究中,利用小分子和变性蛋白质之间的作用,我们研究了一种传统的染料小分子-溴酚蓝（BPB）,具有能够精确的特异性识别淀粉样蛋白的能力以及有效的阻碍淀粉样蛋白的形成。选取牛胰岛素作为淀粉样蛋白模型,在牛胰岛素纤维化的过程中,利用BPB作为监测小分子成功还原了牛胰岛素纤维化的三个阶段。当BPB作为抑制剂加入牛胰岛素体系中时,使得纤维化进程显著减速,并且大大降低了淀粉样的总量甚至是完全抑制。TBNCs纳米粒子是我们设计构筑的一种具有良好的生物相容性的新型水溶性纳米粒子,加热的牛血清白蛋白作为纳米粒子的骨架。由于硫黄素T（ThT）已经普遍被用来作为淀粉样纤维的染料,其可以与淀粉样纤维特异性结合。因此,在加热牛血清白蛋白的过程中,将ThT掺杂于牛血清白蛋白的骨架中。由于牛血清白蛋白变性生成类... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

硫黄素T的化学结构式

带和旋光色散光谱，类似于观察到的淀粉样原纤维样品。Edwards 和 Woody46,47证明，Cibacron 蓝和刚果红结合脱氢酶诱导的圆二色以作为脱氢酶的探针，如肝醇脱氢酶，酵母醇脱氢酶，乳酸脱氢酶和激酶磷酸甘油酸激酶和猪腺苷酸激酶。Edwards 和 Woody48认为，刚果红基于染辅酶结构之间的相似性，与酶的辅酶结合位点结合。刚果红也被证明可以结他天然蛋白，包括细胞朊蛋白49，弹性蛋白50，RNA 聚合酶51和人类前列酸酶52。刚果红结构表明（图 1.2），通过疏水和静电相互作用的组合可以发生与蛋的结合。53,54为了理解刚果红的结合特异性，Khurana 等人使用圆二色性来分析刚果红与原蛋白，部分折叠的蛋白质和淀粉样蛋白原纤维结合的测定果表明刚果红与天然蛋白质结合的机制，涉及刚果红在蛋白质分子间嵌入而蛋白质的寡聚化。55

2.1 (A) 牛胰岛素晶体结构(PDB ID: 2ZP6). (B) 溴酚蓝分子结构。第二节 实验部分.2.1 试剂与仪器牛血清白蛋白（BSA）、氯化钠（NaCl）、溴酚蓝（BPB）等生物试剂由北鼎国昌盛生物科技有限公司供应葡萄糖等购于北京国药集团化学试剂公司盐酸（HCl）等化学试剂从北京化学试剂公司购买所得超纯水由仪器 a Milli-Qsystem (Millipore, Bedford, MA,USA)制备


本文编号：3480792