低浓度纳米银对皮肤成纤维细胞和神经内分泌细胞增殖的影响
发布时间：2021-11-15 19:31
背景纳米银广泛应用于纺织品、化妆品及医疗用品等方面,可经皮肤接触、呼吸道、消化道等多种途径进入机体,增加了机体暴露于纳米银的风险。纳米银作为抗菌敷料在临床上创伤表面的应用较多,然而其潜在的应用风险尚存在争议。目的检测低浓度纳米银暴露对大鼠乳鼠皮肤成纤维细胞和神经内分泌细胞增殖及细胞内沉积的影响,为皮肤创伤愈合过程中纳米银的安全应用提供理论参考。方法1.利用组织贴块法分别取大鼠乳鼠背部和尾尖部的皮肤组织,原代培养皮肤成纤维细胞;常规传代培养神经内分泌细胞;用倒置显微镜观察细胞的生长状态。2.MTT法检测不同浓度梯度的纳米银溶液孵育皮肤成纤维细胞（20-10000ng/ml）和神经内分泌细胞（20-5000 ng/ml）后的细胞存活率。3.选用不同终浓度的纳米银溶液分别孵育皮肤成纤维细胞和神经内分泌细胞,在不同的作用时间点,倒置显微镜观察活细胞形态,电子显微镜观察纳米银在皮肤成纤维细胞和神经内分泌细胞内的沉积。4.选用终浓度为20 ng/ml、200 ng/ml、2000 ng/ml的纳米银溶液孵育皮肤成纤维细胞48 h,提取DNA,琼脂糖凝胶电泳检测DNA有无片段化。5.选用终浓度为20...
【文章来源】：新乡医学院河南省
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
皮肤成纤维细胞的体外培养Fig.1Thecultureofskinfibroblastsinvitro
图 2 免疫荧光染色示皮肤成纤维细胞 Vimentin 表达Fig.2 Immunofluorescence staining showed the expression of vimentin in skin fibroblasts 2 示免疫荧光染色示皮肤成纤维细胞 Vimentin 表达。A: 红色 CY3 标记的 Vimentin，示背部来源的传代成纤胞，表达 Vimentin 阳性；B: 蓝色为 DAPI 标记的背部来源的传代成纤维细胞的细胞核；C: A 图和 B 图的叠果；D:红色 CY3 标记的 Vimentin，示尾尖部来源的传代成纤维细胞，表达 Vimentin 阳性；E: 蓝色为 DAPI的尾尖部来源的传代成纤维细胞的细胞核；图 F:D 图和 E 图的叠加效果。标尺为 100 μm。ig.2 Immunofluorescence staining showed the expression of vimentin in skin fibroblasts from the back and tail ofew-born rat. A: Immunofluorescent staining of skin fibroblasts from the back, CY3 labeled Vimentin was shown in : Blue indicated the nuclear of skin fibroblasts from the back stained by DAPI. C: The superimposed effects came fhart A and B. D: Immunofluorescent staining of skin fibroblasts from the tail, CY3 labeled Vimentin was shown in : Blue indicated the nuclear of skin fibroblasts from the tail stained by DAPI. C: The superimposed effects came fhart D and E. Scale bar=100 μm.
‐0.400.40.81.21.620 50 100 200 500 1000 2000 5000 10000eRlative elcl viabitylConc. of AgNPs, ng/ml图 3 MTT 法测定不同浓度梯度的纳米银孵育皮肤成纤维细胞 48 h 后的相对存活率Fig.3 MTT assay measured the relative cell viability of skin fibroblasts incubated by different concentration gradient ofsilver nanoparticles for 48 h** P<0.01, 5000 ng/ml、10000 ng/ml 组与 20 ng/ml 组相比；*P<0.05, 2000 ng/ml 组与 20 ng/ml 组相比。误差线代表标准误（n=4）。** P<0.01, 5000 ng/ml and 10000 ng/ml silver nanoparticles groups compared to 20 ng/ml silver nanoparticles group; *P<0.05, 2000 ng/ml silver nanoparticles group compared to 20 ng/ml silver nanoparticles group. Standard bar meansstandard error (n=4).
【参考文献】：
期刊论文
[1]大鼠乳鼠皮肤成纤维细胞的分离和体外培养[J]. 韩瑞,孙永琨. 新乡医学院学报. 2016(02)
[2]Antiproliferative effect of silver nanoparticles synthesized using amla on Hep2 cell line[J]. Fathima Stanley Rosarin,Vadivel Arulmozhi,Samuthira Nagarajan,Sankaran Mirunalini. Asian Pacific Journal of Tropical Medicine. 2013(01)
[3]补液和抗炎在严重烧伤早期救治中的价值[J]. 孙永华. 中华损伤与修复杂志(电子版). 2012(05)
[4]人皮肤成纤维细胞的高效分离培养及鉴定[J]. 刘爱军,靳俊峰. 广东医学. 2008(12)
[5]成年小鼠成纤维细胞体外培养[J]. 李煜,梁琳,旭日干. 内蒙古大学学报(自然科学版). 2006(02)
[6]人皮肤成纤维细胞的分离和体外培养[J]. 陈勇,戴和平,龙志高,潘乾,郑多,夏昆,夏家辉. 湖南医科大学学报. 2002(05)
本文编号：3497370
【文章来源】：新乡医学院河南省
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
皮肤成纤维细胞的体外培养Fig.1Thecultureofskinfibroblastsinvitro
图 2 免疫荧光染色示皮肤成纤维细胞 Vimentin 表达Fig.2 Immunofluorescence staining showed the expression of vimentin in skin fibroblasts 2 示免疫荧光染色示皮肤成纤维细胞 Vimentin 表达。A: 红色 CY3 标记的 Vimentin，示背部来源的传代成纤胞，表达 Vimentin 阳性；B: 蓝色为 DAPI 标记的背部来源的传代成纤维细胞的细胞核；C: A 图和 B 图的叠果；D:红色 CY3 标记的 Vimentin，示尾尖部来源的传代成纤维细胞，表达 Vimentin 阳性；E: 蓝色为 DAPI的尾尖部来源的传代成纤维细胞的细胞核；图 F:D 图和 E 图的叠加效果。标尺为 100 μm。ig.2 Immunofluorescence staining showed the expression of vimentin in skin fibroblasts from the back and tail ofew-born rat. A: Immunofluorescent staining of skin fibroblasts from the back, CY3 labeled Vimentin was shown in : Blue indicated the nuclear of skin fibroblasts from the back stained by DAPI. C: The superimposed effects came fhart A and B. D: Immunofluorescent staining of skin fibroblasts from the tail, CY3 labeled Vimentin was shown in : Blue indicated the nuclear of skin fibroblasts from the tail stained by DAPI. C: The superimposed effects came fhart D and E. Scale bar=100 μm.
‐0.400.40.81.21.620 50 100 200 500 1000 2000 5000 10000eRlative elcl viabitylConc. of AgNPs, ng/ml图 3 MTT 法测定不同浓度梯度的纳米银孵育皮肤成纤维细胞 48 h 后的相对存活率Fig.3 MTT assay measured the relative cell viability of skin fibroblasts incubated by different concentration gradient ofsilver nanoparticles for 48 h** P<0.01, 5000 ng/ml、10000 ng/ml 组与 20 ng/ml 组相比；*P<0.05, 2000 ng/ml 组与 20 ng/ml 组相比。误差线代表标准误（n=4）。** P<0.01, 5000 ng/ml and 10000 ng/ml silver nanoparticles groups compared to 20 ng/ml silver nanoparticles group; *P<0.05, 2000 ng/ml silver nanoparticles group compared to 20 ng/ml silver nanoparticles group. Standard bar meansstandard error (n=4).
【参考文献】：
期刊论文
[1]大鼠乳鼠皮肤成纤维细胞的分离和体外培养[J]. 韩瑞,孙永琨. 新乡医学院学报. 2016(02)
[2]Antiproliferative effect of silver nanoparticles synthesized using amla on Hep2 cell line[J]. Fathima Stanley Rosarin,Vadivel Arulmozhi,Samuthira Nagarajan,Sankaran Mirunalini. Asian Pacific Journal of Tropical Medicine. 2013(01)
[3]补液和抗炎在严重烧伤早期救治中的价值[J]. 孙永华. 中华损伤与修复杂志(电子版). 2012(05)
[4]人皮肤成纤维细胞的高效分离培养及鉴定[J]. 刘爱军,靳俊峰. 广东医学. 2008(12)
[5]成年小鼠成纤维细胞体外培养[J]. 李煜,梁琳,旭日干. 内蒙古大学学报(自然科学版). 2006(02)
[6]人皮肤成纤维细胞的分离和体外培养[J]. 陈勇,戴和平,龙志高,潘乾,郑多,夏昆,夏家辉. 湖南医科大学学报. 2002(05)
本文编号：3497370
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