载抗癌药物白蛋白纳米颗粒的制备及性能评价
发布时间：2021-12-17 19:07
当前纳米药物递送系统的研究依然是热点,将化疗药物载入纳米载体可以减轻药物的毒副作用、增加其水溶性、延长体内的循环时间、增加药物的疗效。本文利用去溶剂化-化学交联法制备了载阿霉素（DOX）和载藤黄酸（GA）的牛血清白蛋白纳米颗粒（BSA NPs）,进行一系列的理化表征和优化,并对其进行体外和体内抗癌活性表征。论文主要工作如下:首先,利用去溶剂化-化学交联法制备了DOX-BSA NPs（DNP）和GA-BSA NPs（GNP）。利用minitab软件设计了23全因子实验,以载药量为指标,通过对实验结果进行软件分析,优化了DNP和GNP的制备工艺。体外药物释放实验表明,DNP和GNP具有酸性刺激响应性释放特性,表明能在肿瘤细胞内偏酸性环境下响应释放药物。其次,考察了DNP和GNP体外抗癌活性,实验结果表明DNP和GNP联合用药具有协同抗癌作用。首先考察了DOX和GA的细胞毒性。DOX和GA都能明显抑制HepG2肝癌细胞的存活。两药按照不同比例联用均有协同作用,当两药的联用比为1:1时具有最强的协同作用,联合指数（combination index,CI）为0.22。DO...
【文章来源】：华侨大学福建省
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同类型的纳米载药体系[1]
7纳米颗粒用钆螯合的白蛋白修饰后可用于磁共振成像和胞内氧化还原响应的药物释放[51]。除了上述的载药功能，白蛋白还可以作为模板用以合成荧光金属串，荧光量子点和非荧光无机纳米颗粒等[52-54]。1.3联合化疗的研究进展传统的单药化疗存在易导致肿瘤细胞产生抗药性的缺点，而联合治疗可以增强药效、减轻多药抗性、调控癌细胞中的不同的信号途径、敏化癌细胞以及通过降低联合药物各自的给药剂量而起到减轻副作用的目的[55]。目前已发展出化疗与其他治疗方法结合的联合治疗方法包括联合化疗、化疗与光疗联合、化疗与免疫治疗联合、化疗与基因治疗联合、多种联合方式等，如下图1.2所示[55]：图1.2联合治疗的各种联合模式[55]Fig.1.2Variouscombinationmodeofcombinationtherapy[55]本文采用的联合治疗模式是联合化疗。联合化疗用药有以下要求：（1）药物之间无重叠毒性；（2）联合药物对癌症有不同的治疗机理；（3）药物之间有最优化的剂量比例用于协同或叠加治疗；（4）药物之间要有相似的溶解度和渗透性。联合化疗效果可以通过计算联合指数（CombinationIndex,CI）来衡量。CI>1表明两药有拮抗作用，CI=1表明两药是效果叠加的作用，而CI<1表明两药具
10图1.3BSANPs制备工艺Fig.1.3PreparationprocessofBSAnanoparticles具体研究内容如下：（1）用去溶剂化-化学交联法制备了DNP和GNP。分别采用SEM和TEM技术表征纳米颗粒的形貌和粒径。利用minitab软件设计全因子实验，进行了粒径、电位、载药量、包封率、得率的表征，软件分析结果，分别选出DOX和GA载药量较高的优化的BSA制备工艺。分别用优化工艺制备的DNP和GNP进行pH5.0和pH7.4环境下的药物释放实验。（2）细胞实验选取HepG2肝癌细胞株。对DOX和GA及其联合用药进行细胞毒性和细胞周期实验。对空白BSANPs和以优化工艺制备的DNP和GNP进行细胞毒性实验，细胞毒性实验采用甲基噻唑基四唑（MethylThiazolylTetrazolium,MTT）法。采用激光共聚焦显微镜（ConfocalLaserScanningMicroscope,CLSM）观察DOX和GA以及载药纳米颗粒的细胞摄取情况。（3）对载药纳米颗粒进行体内生物学评价。用适龄裸鼠构建HepG2肝细胞癌模型，分为7组，考察DOX和GA，载药纳米颗粒及其联合用药的抗瘤效果，定时记录各组裸鼠的肿瘤体积变化，裸鼠的质量变化，做了不同时间DOX以及DNP的器官分布图。初次给药21天后处死裸鼠，取心、肝、脾、肺、肾、肿瘤做苏木精-伊红（Hematoxylin-Eosin,HE）染色。对肿瘤进行c-Caspase-3以及Ki-67染色。详细技术路线图如图1.4所示：
【参考文献】：
期刊论文
[1]血清白蛋白纳米药物载体的制备及应用[J]. 商宏华,申有青. 功能高分子学报. 2013(03)
[2]白蛋白作为药物载体的研究[J]. 张建军,高缘,孙婉瑾. 化学进展. 2011(08)
博士论文
[1]肿瘤微环境响应药物载体的设计和应用[D]. 都小姣.中国科学技术大学 2014
[2]贝伐单抗介导盐酸阿霉素白蛋白纳米粒靶向给药系统的研究[D]. 李磊.沈阳药科大学 2011
[3]白蛋白纳米粒作为疏水性和亲水性药物的载体研究[D]. 陈卫.复旦大学 2008
硕士论文
[1]基于计算药剂学下的藤黄酸—姜黄素纳米胶束研究[D]. 郭鸣睿.辽宁大学 2018
[2]阿霉素白蛋白纳米粒的研制及性质的初步考察[D]. 魏雪.河北医科大学 2008
本文编号：3540752
【文章来源】：华侨大学福建省
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同类型的纳米载药体系[1]
7纳米颗粒用钆螯合的白蛋白修饰后可用于磁共振成像和胞内氧化还原响应的药物释放[51]。除了上述的载药功能，白蛋白还可以作为模板用以合成荧光金属串，荧光量子点和非荧光无机纳米颗粒等[52-54]。1.3联合化疗的研究进展传统的单药化疗存在易导致肿瘤细胞产生抗药性的缺点，而联合治疗可以增强药效、减轻多药抗性、调控癌细胞中的不同的信号途径、敏化癌细胞以及通过降低联合药物各自的给药剂量而起到减轻副作用的目的[55]。目前已发展出化疗与其他治疗方法结合的联合治疗方法包括联合化疗、化疗与光疗联合、化疗与免疫治疗联合、化疗与基因治疗联合、多种联合方式等，如下图1.2所示[55]：图1.2联合治疗的各种联合模式[55]Fig.1.2Variouscombinationmodeofcombinationtherapy[55]本文采用的联合治疗模式是联合化疗。联合化疗用药有以下要求：（1）药物之间无重叠毒性；（2）联合药物对癌症有不同的治疗机理；（3）药物之间有最优化的剂量比例用于协同或叠加治疗；（4）药物之间要有相似的溶解度和渗透性。联合化疗效果可以通过计算联合指数（CombinationIndex,CI）来衡量。CI>1表明两药有拮抗作用，CI=1表明两药是效果叠加的作用，而CI<1表明两药具
10图1.3BSANPs制备工艺Fig.1.3PreparationprocessofBSAnanoparticles具体研究内容如下：（1）用去溶剂化-化学交联法制备了DNP和GNP。分别采用SEM和TEM技术表征纳米颗粒的形貌和粒径。利用minitab软件设计全因子实验，进行了粒径、电位、载药量、包封率、得率的表征，软件分析结果，分别选出DOX和GA载药量较高的优化的BSA制备工艺。分别用优化工艺制备的DNP和GNP进行pH5.0和pH7.4环境下的药物释放实验。（2）细胞实验选取HepG2肝癌细胞株。对DOX和GA及其联合用药进行细胞毒性和细胞周期实验。对空白BSANPs和以优化工艺制备的DNP和GNP进行细胞毒性实验，细胞毒性实验采用甲基噻唑基四唑（MethylThiazolylTetrazolium,MTT）法。采用激光共聚焦显微镜（ConfocalLaserScanningMicroscope,CLSM）观察DOX和GA以及载药纳米颗粒的细胞摄取情况。（3）对载药纳米颗粒进行体内生物学评价。用适龄裸鼠构建HepG2肝细胞癌模型，分为7组，考察DOX和GA，载药纳米颗粒及其联合用药的抗瘤效果，定时记录各组裸鼠的肿瘤体积变化，裸鼠的质量变化，做了不同时间DOX以及DNP的器官分布图。初次给药21天后处死裸鼠，取心、肝、脾、肺、肾、肿瘤做苏木精-伊红（Hematoxylin-Eosin,HE）染色。对肿瘤进行c-Caspase-3以及Ki-67染色。详细技术路线图如图1.4所示：
【参考文献】：
期刊论文
[1]血清白蛋白纳米药物载体的制备及应用[J]. 商宏华,申有青. 功能高分子学报. 2013(03)
[2]白蛋白作为药物载体的研究[J]. 张建军,高缘,孙婉瑾. 化学进展. 2011(08)
博士论文
[1]肿瘤微环境响应药物载体的设计和应用[D]. 都小姣.中国科学技术大学 2014
[2]贝伐单抗介导盐酸阿霉素白蛋白纳米粒靶向给药系统的研究[D]. 李磊.沈阳药科大学 2011
[3]白蛋白纳米粒作为疏水性和亲水性药物的载体研究[D]. 陈卫.复旦大学 2008
硕士论文
[1]基于计算药剂学下的藤黄酸—姜黄素纳米胶束研究[D]. 郭鸣睿.辽宁大学 2018
[2]阿霉素白蛋白纳米粒的研制及性质的初步考察[D]. 魏雪.河北医科大学 2008
本文编号：3540752
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