一种磁性Fe 3 O 4 @mTiO 2 -AIPA微球用于分离磷酸化蛋白的研究
发布时间：2023-05-31 21:29
蛋白质磷酸化作为一种十分重要的翻译后修饰手段,参与了细胞分化、新陈代谢、信息转导等众多生理过程。大量研究表明,蛋白质磷酸化异常与许多重要疾病的发生息息相关,尤其是癌症和神经退行性疾病。因此,采用适当的方法对磷酸化蛋白进行全面分析有助于相关疾病的病理研究和早期诊断。但是,由于磷酸化蛋白的丰度及离子化效率很低,当采用质谱技术对其进行分析时,会受到大量非磷酸化蛋白和无机盐的干扰。因此,在质谱分析前对复杂样品中的磷酸化蛋白或磷酸化肽进行选择性分离富集显得至关重要。目前,针对磷酸化蛋白质组学的研究策略主要有两种:基于酶切肽段的bottom-up策略和基于完整蛋白质的top-down策略。与bottom-up策略相比,由于缺乏有效的完整磷酸化蛋白分离富集材料和方法,top-down策略的发展受到了很大限制。目前除了价格昂贵的免疫共沉淀法之外,专门针对于有效抓取整条磷酸化蛋白的方法还鲜有报道。基于此,本论文结合了介孔材料、磁性材料和硫脲类阴离子受体三者的优势,开发出一种新型有机/无机杂化材料用于磷酸化蛋白和非磷酸化蛋白的直接分离。本论文实验探究内容如下:(1)设计了一种基于硫脲的识别单体5-(3-丙...
【文章页数】：102 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
第1章 绪论
1.1 翻译后修饰蛋白质组学研究的意义
1.2 蛋白质磷酸化修饰的概述
1.2.1 定义和主要类型
1.2.2 重要的生物学意义
1.3 磷酸化蛋白质组学的研究策略
1.3.1 Bottom-up策略
1.3.2 磷酸化肽的分离富集方法
1.3.3 Top-down策略
1.3.4 磷酸化蛋白的分离富集方法
1.4 有机/无机杂化材料用于分离富集磷酸化蛋白的优势
1.5 阴离子受体用于识别磷酸根的概述
1.6 本论文研究内容与创新点
1.6.1 本论文研究内容
1.6.2 本论文创新点
第2章 基于硫脲的有机单体与磷酸化蛋白相互作用的研究
2.1 引言
2.2 实验部分
2.2.1 主要实验原料及仪器
2.2.2 重要有机单体的合成
2.2.3 分子间相互作用的荧光滴定实验
2.2.4 分子间相互作用的核磁滴定实验
2.2.5 分子间相互作用的红外滴定实验
2.2.6 AIPA单分子层对磷酸化蛋白的QCM吸附实验
2.2.7 AIPA单分子层表面AFM形貌测试
2.2.8 AIPA单分子层表面接触角测试
2.3 实验结果与分析
2.3.1 合成产物的表征
2.3.2 荧光滴定结果分析
2.3.3 核磁滴定结果分析
2.3.4 红外滴定结果分析
2.3.5 QCM吸附实验结果分析
2.3.6 AFM形貌测试结果分析
2.3.7 表面接触角测试结果分析
2.4 本章小结
第3章 Fe3O4@mTiO2-AIPA材料的制备与表征
3.1 引言
3.2 实验部分
3.2.1 主要实验原料及仪器
3.2.2 实验方法
3.2.3 表征测试方法
3.3 实验结果与分析
3.3.1 样品形貌表征
3.3.2 样品比表面积及孔径分析
3.3.3 样品X射线衍射分析
3.3.4 样品磁响应性分析
3.3.5 样品热失重分析
3.3.6 样品红外光谱分析
3.3.7 样品X射线光电子能谱分析
3.3.8 样品表面电势分析
3.4 本章小结
第4章 Fe3O4@mTiO2-AIPA材料在磷酸化蛋白分离中的应用
4.1 引言
4.2 实验部分
4.2.1 主要实验原料及仪器
4.2.2 磷酸化蛋白的分离过程
4.2.3 RP-HPLC分析步骤
4.3 实验结果与分析
4.3.1 不同梯度程序对蛋白标准品洗脱效果的影响
4.3.2 不同流动相组成对蛋白标准品洗脱效果的影响
4.3.3 Fe3O4@mTiO2-AIPA材料直接分离α-酪蛋白结果分析
4.4 本章小结
第5章 论文结论与展望
5.1 论文结论
5.2 展望
致谢
参考文献
攻读硕士期间获得与学位论文相关的科研成果
参加科研项目情况
本文编号：3826035
【文章页数】：102 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
第1章 绪论
1.1 翻译后修饰蛋白质组学研究的意义
1.2 蛋白质磷酸化修饰的概述
1.2.1 定义和主要类型
1.2.2 重要的生物学意义
1.3 磷酸化蛋白质组学的研究策略
1.3.1 Bottom-up策略
1.3.2 磷酸化肽的分离富集方法
1.3.3 Top-down策略
1.3.4 磷酸化蛋白的分离富集方法
1.4 有机/无机杂化材料用于分离富集磷酸化蛋白的优势
1.5 阴离子受体用于识别磷酸根的概述
1.6 本论文研究内容与创新点
1.6.1 本论文研究内容
1.6.2 本论文创新点
第2章 基于硫脲的有机单体与磷酸化蛋白相互作用的研究
2.1 引言
2.2 实验部分
2.2.1 主要实验原料及仪器
2.2.2 重要有机单体的合成
2.2.3 分子间相互作用的荧光滴定实验
2.2.4 分子间相互作用的核磁滴定实验
2.2.5 分子间相互作用的红外滴定实验
2.2.6 AIPA单分子层对磷酸化蛋白的QCM吸附实验
2.2.7 AIPA单分子层表面AFM形貌测试
2.2.8 AIPA单分子层表面接触角测试
2.3 实验结果与分析
2.3.1 合成产物的表征
2.3.2 荧光滴定结果分析
2.3.3 核磁滴定结果分析
2.3.4 红外滴定结果分析
2.3.5 QCM吸附实验结果分析
2.3.6 AFM形貌测试结果分析
2.3.7 表面接触角测试结果分析
2.4 本章小结
第3章 Fe3O4@mTiO2-AIPA材料的制备与表征
3.1 引言
3.2 实验部分
3.2.1 主要实验原料及仪器
3.2.2 实验方法
3.2.3 表征测试方法
3.3 实验结果与分析
3.3.1 样品形貌表征
3.3.2 样品比表面积及孔径分析
3.3.3 样品X射线衍射分析
3.3.4 样品磁响应性分析
3.3.5 样品热失重分析
3.3.6 样品红外光谱分析
3.3.7 样品X射线光电子能谱分析
3.3.8 样品表面电势分析
3.4 本章小结
第4章 Fe3O4@mTiO2-AIPA材料在磷酸化蛋白分离中的应用
4.1 引言
4.2 实验部分
4.2.1 主要实验原料及仪器
4.2.2 磷酸化蛋白的分离过程
4.2.3 RP-HPLC分析步骤
4.3 实验结果与分析
4.3.1 不同梯度程序对蛋白标准品洗脱效果的影响
4.3.2 不同流动相组成对蛋白标准品洗脱效果的影响
4.3.3 Fe3O4@mTiO2-AIPA材料直接分离α-酪蛋白结果分析
4.4 本章小结
第5章 论文结论与展望
5.1 论文结论
5.2 展望
致谢
参考文献
攻读硕士期间获得与学位论文相关的科研成果
参加科研项目情况
本文编号：3826035
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/cailiaohuaxuelunwen/3826035.html
