基于碳基纳米材料—鲁米诺的电致化学发光生物酶传感新方法研究

发布时间：2023-08-11 11:25

　　本论文首先综述电致化学发光的基本原理、常见的反应类型及常用的发光试剂和纳米材料参与电化学发光构建生物传感的现状。石墨烯量子点作为一种新型电化学发光试剂,在构建生物传感方面也表现出良好的特性。基于ECL-RET技术已应用于DNA、细胞传感及免疫分析等领域。基于此,本论文以电化学发光方法构建生物传感为目标,利用纳米材料信号增强作用,构建新型电化学发光生物传感器分别用于DNA甲基转移酶和蛋白激酶的检测,进一步开展了DNA甲基转移酶和蛋白激酶对应抑制剂的筛选等相关研究,主要包括以下两个方面的工作:1.成功合成了具有电化学发光特性的GO/AgNPs/luminol复合物用于构建新型Dam MTase活性检测的ECL传感器。首先,在氧化石墨烯表面以luminol为还原剂还原硝酸银(AgNO3)为AgNPs,成功制备了具有电化学发光特性的GO/AgNPs/luminol复合物,接着加入炔丙胺后通过Ag-N键形成炔基功能化的GO/AgNPs/luminol复合物,在Cu(I)催化下炔基化合物与叠氮化合物发生点击反应将GO/AgNPs/luminol复合物组装在叠氮修饰dsDNA的电极表面,在共反应剂H...

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第1章 绪论
    1.1 电致化学发光
        1.1.1 电化学发光的介绍
        1.1.2 电致化学发光的基本机理
        1.1.3 电化学发光体系的基本类型
        1.1.4 量子点体系
    1.2 纳米材料在电化学发光中的应用
        1.2.1 纳米材料的概念以及基本特性
        1.2.2 纳米材料用于电化学发光传感器
    1.3 纳米材料构建电化学发光传感器用于生物检测
        1.3.1 DNA甲基转移酶
        1.3.2 蛋白激酶
    1.4 能量共振转移在纳米电化学发光中的应用
        1.4.1 能量共振转移
        1.4.2 能量共振转移在纳米电化学发光中的应用
    1.5 本课题的提出
第2章 GO/AgNPs/luminol复合物的合成及其电化学发光检测DNA甲基化转移酶的活性
    2.1 前言
    2.2 实验部分
        2.2.1 材料与试剂
        2.2.2 设备
        2.2.3 氧化石墨烯的合成
        2.2.4 合成炔基功能化GO/AgNPs /luminol复合材料
        2.2.5 通过click反应组装电化学发光试剂
        2.2.6 ECL检测Dam MTase活性
        2.2.7 抑制剂对Dam MTase活性影响
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 免标记ECL检测Dam MTase活性
        2.3.2 GO/AgNPs/luminol复合材料的表征
        2.3.3 生物传感器的表征
        2.3.4 电化学发光生物传感器的可行性分析
        2.3.5 条件优化
        2.3.6 ECL测定Dam MTase活性
        2.3.7 DNA MTase活性抑制剂的分析
    2.4 结论
第3章 双电位比率电致化学发光检测蛋白激酶活性
    3.1 前言
    3.2 实验部分
        3.2.1 材料与试剂
        3.2.2 仪器
        3.2.3 GQDs的合成
        3.2.4 金纳米粒子的形成
        3.2.5 电极的组装过程
        3.2.6 ECL表征及激酶活性的检测
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 双电位比率ECL方法检测PKA激酶活性
        3.3.2 GQDs和Au NPs的表征
        3.3.3 构建的生物传感表征
        3.3.4 生物传感的ECL行为
        3.3.5 检测条件的优化
        3.3.6 ECL检测PKA活性
        3.3.7 激酶抑制剂考察
        3.3.8 ECL传感的重现性及再现性
        3.3.9 复杂生物样品中分析PKA活性
    3.4 结论
第4章 展望
参考文献
致谢
攻读硕士期间的研究成果



本文编号：3841239