PDA/SiO 2 大孔复合材料固定化荧光假单胞菌脂肪酶

发布时间：2024-03-16 10:19

　　以具有三维骨架结构的大孔聚合物为模板制备SiO₂大孔材料,通过多巴胺在SiO₂大孔材料孔道表面的原位聚合制得聚多巴胺表面功能化修饰的二氧化硅大孔材料(PDA/SiO₂)。应用SEM、EDX、MIP、BET、TG-DTA和FTIR等技术对修饰前后的材料进行表征。以PDA/SiO₂为载体固定荧光假单胞菌脂肪酶(PFL),优化固定化条件并对比游离脂肪酶和固定化脂肪酶的性质。结果表明SiO₂大孔材料具有三维连续贯通的孔道结构,孔径分布在300⁵00 nm,聚多巴胺修饰后形成聚多巴胺/二氧化硅复合纳米薄膜构筑的大孔材料。在固定化时间为14 h、p H值为8、初始脂肪酶浓度为0.4 mg·m L-1时,固定化效果最佳,酶活回收率达246%。与游离脂肪酶相比,固定化脂肪酶有更宽的温度和p H适用范围、热稳定性显著提高,并展现出良好的储存稳定性和操作稳定性,固定化脂肪酶的Km低于游离脂肪酶的,酶与底物的亲和性较好。

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【文章目录】：
0 引言
1 实验部分
    1.1 Si O2大孔材料的制备
    1.2 PDA/Si O2大孔复合材料的制备
    1.3 PFL的固定化
    1.4 表征方法
    1.5 酶活和蛋白含量的测定
2 结果与讨论
    2.1 材料的表征
        2.1.1 材料的形貌分析
        2.1.2 孔性质及比表面积分析
        2.1.3 结构组成表征
    2.2 固定化脂肪酶条件的优化
        2.2.1 初始脂肪酶浓度对固定化的影响
        2.2.2 固定化时间的影响
        2.2.3 p H值对脂肪酶固定化的影响
    2.3 固定化酶的酶学性质
        2.3.1 最适p H值和温度
        2.3.2 热稳定性
        2.3.3 操作稳定性和储存稳定性
    2.4 动力学常数
3 结论



本文编号：3929512