基于核酸适配体的17β-雌二醇检测方法研究

发布时间：2017-10-10 05:00

  本文关键词：基于核酸适配体的17β-雌二醇检测方法研究

  更多相关文章： 核酸适配体 纳米金 共振散射法 比色法 荧光法

【摘要】：当下,雌激素污染越来越受到人们的关注。17β-雌二醇是一种雌性活性最为强烈的雌激素。然而,目前针对17β-雌二醇的检测方法,虽然有较低的检测限和较好的灵敏度,但是这些方法在一定程度难以满足实际样品的现场-实时定量检测。本论文基于核酸适配体-纳米金开发了三种新型的生物传感检测体系来实现对17β-雌二醇的检测,主要结果如下：(1)共振散射光谱法：利用氯化钠可控制纳米金的聚合程度,再结合共振散射光谱技术构建一种生物传感器的方法,该方法的检测限达到1.26 nM,并且应用到牛奶样品的添加回收实验中,平均回收率在93.9%～108.3%之间,相对标准偏差在4.6%-6.1%之间；(2)比色法：基于核酸适配体、纳米金、阳离子表面活性剂三者之间的相互作用,从而开发了一种比色传感器。该方法的检测限为1.96nM,通过采集自来水和河水进行添加回收实验,平均回收率在95.3%～115.4%之间,相对标准偏差在2.6%-8.6%之间;(3)荧光法：基于核酸适配体,利用纳米金来淬灭罗丹明B的荧光,从而构建了一种类似于信号放大的荧光传感体系。该方法的检测限为0.51 nM,另外,通过水溶液中混合样品的添加回收实验,得到样品的添加回收率范围在94.26%～117.14%之间,相对标准偏差范围在0.049%～0.73%之间。研究结果表明,本论文开发的三种新型的生物传感器具有简单快速、灵敏度高、特异性好等优点,可为进一步实际应用提供理论依据。
【关键词】：核酸适配体 纳米金 共振散射法 比色法 荧光法
【学位授予单位】：上海应用技术学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：O657.3
【目录】：

• 摘要4-5
• abstract5-10
• 第1章 绪论10-17
• 1.1 17β-雌二醇的简介与危害10-12
• 1.1.1 17β-雌二醇的简介10
• 1.1.2 17β-雌二醇的危害10-12
• 1.2 17β-雌二醇检测方法的研究进展12-14
• 1.2.1 传统检测法12-13
• 1.2.2 免疫分析法13-14
• 1.2.3 电化学法14
• 1.3 基于核酸适配体-纳米金在分析检测领域中的应用14-16
• 1.3.1 基于核酸适配体-纳米金检测金属离子15
• 1.3.2 基于核酸适配体-纳米金检测抗生素15-16
• 1.3.3 基于核酸适配体-纳米金检测有机小分子16
• 1.4 研究的目的与意义16-17
• 1.4.1 研究的目的16
• 1.4.2 研究的意义16-17
• 第2章 基于核酸适配体的非标记AuNPs共振散射光谱法检测17β-雌二醇17-30
• 2.1 引言17-18
• 2.2 实验材料18-19
• 2.2.1 主要试剂18-19
• 2.2.2 主要仪器19
• 2.3 实验方法19-21
• 2.3.1 纳米金的合成19-20
• 2.3.2 牛奶样品的前处理20
• 2.3.3 17β-雌二醇的检测20
• 2.3.4 核酸适配体和AuNPs的表征20-21
• 2.3.5 添加回收实验21
• 2.4 结果与讨论21-29
• 2.4.1 检测原理21-22
• 2.4.2 圆二色光谱表征22-23
• 2.4.3 透射电子显微镜表征23-24
• 2.4.4 检测条件的优化24-26
• 2.4.5 方法的灵敏度26-27
• 2.4.6 方法的特异性27-28
• 2.4.7 牛奶样品添加回收率检测28-29
• 2.5 小结29-30
• 第3章 基于核酸适配体的阳离子表面活性剂聚集AuNPs比色法检测17β-雌二醇30-43
• 3.1 引言30
• 3.2 实验材料30-32
• 3.2.1 主要试剂30-32
• 3.2.2 主要仪器32
• 3.3 实验方法32-34
• 3.3.1 纳米金的合成32
• 3.3.2 检测条件的优化32-33
• 3.3.3 17β-雌二醇的检测33
• 3.3.4 核酸适配体、CTAB和AuNPs的表征33-34
• 3.3.5 添加回收实验34
• 3.4 结果与讨论34-42
• 3.4.1 检测原理34-35
• 3.4.2 圆二色光谱表征35-36
• 3.4.3 透射电子显微镜表征36-37
• 3.4.4 检测条件的优化37-39
• 3.4.5 方法的灵敏度39-40
• 3.4.6 方法的特异性40-42
• 3.4.7 添加回收率实验42
• 3.5 小结42-43
• 第4章 基于核酸适配体的AuNPs淬灭罗丹明B荧光法检测17β-雌二醇43-57
• 4.1 引言43
• 4.2 实验材料43-45
• 4.2.1 主要试剂43-45
• 4.2.2 主要仪器45
• 4.3 实验方法45-47
• 4.3.1 纳米金的合成45
• 4.3.2 检测条件的优化45-46
• 4.3.3 17β-雌二醇的检测46
• 4.3.4 AuNPs的表征46-47
• 4.3.5 添加回收实验47
• 4.4 结果与讨论47-55
• 4.4.1 检测原理47-48
• 4.4.2 电子透射电镜表征48-49
• 4.4.3 检测条件的优化49-52
• 4.4.4 方法的灵敏度52-53
• 4.4.5 方法的特异性53-55
• 4.4.6 添加回收率实验55
• 4.5 小结55-57
• 第5章 总结与展望57-61
• 5.1 研究总结57-59
• 5.1.1 基于核酸适配体的非标记AuNPs共振散射光谱法58
• 5.1.2 基于核酸适配体的阳离子表面活性剂聚集AuNPs比色法58-59
• 5.1.3 基于核酸适配体的AuNPs淬灭罗丹明B荧光法59
• 5.2 创新点59-60
• 5.3 展望60-61
• 参考文献61-67
• 致谢67-68
• 攻读学位期间所开展的科研项目和发表的学术论文68-69

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