酶电极法快速测定甘油含量的研究
本文关键词:酶电极法快速测定甘油含量的研究
【摘要】:利用酶固定化技术,以甘油激酶(GK)、甘油-3-磷酸氧化酶(GPO)为反应酶,研究GK、GPO的固定化方法及固定化模式,制备甘油酶膜、甘油酶电极,并利用其测定甘油含量。结果表明,GK、GPO按1∶1比例固定化时,酶电极电流信号最高;最高效固定模式为:GK固定于核微孔膜,共价偶联GPO固定于Biodyne膜,形成共价双酶膜,进而组装为甘油酶电极。性能研究表明,甘油酶电极最适pH值为7.0,最佳温度为28~32℃;最佳实验条件下,线性范围为0.05~9.00 g/L;回收率为98.4%~102.4%,稳定性高,相对标准偏差(RSD)5%;测定结果与高效液相色谱法、高碘酸氧化法比较,无明显差异(P0.05),且该方法操作简单,专一性强,检测快速,适于实际生产中甘油的实时定量及监控。
【作者单位】: 山东省科学院能源研究所;山东省生物质气化技术重点实验室;山东省科学院生物研究所;山东省生物传感器重点实验室;
【关键词】: 甘油 固定化酶膜 酶电极
【基金】:山东省重点研发项目(2015GSF121047);山东省重点研发项目(2015GSF117034) 公益性行业(农业)科研专项(201503135-04) 山东省自然科学基金(ZR2016YL007)资助项目
【分类号】:TQ920.6;O657.1
【正文快照】: 甘油是一种重要的微生物碳源,发酵生产中,甘油作为碳源广泛应用于基因工程菌培养及生物活性大分子表达[1]。当前发酵领域广泛采用的毕赤酵母(Pichiapastoris),其生长阶段以甘油为唯一碳源,表达阶段以甲醇为碳源。研究表明,混合碳源的流加控制[2]、培养温度[3]等条件均影响毕赤
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本文编号:1029438
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