快速检测巯基化合物的新方法研究

发布时间：2017-10-26 08:36

  本文关键词：快速检测巯基化合物的新方法研究

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【摘要】：由于巯基化合物在医疗健康和科学研究中所起的不可或缺的作用,巯基化合物的检测方法逐渐成为分析化学中的一个热点。在诸多方法当中,荧光方法由于其低成本、高选择性、高灵敏度度以及各种各样的荧光探针等优势而逐渐成为巯基化合物的主要检测方法之一。但是荧光法检测巯基化合物普遍存在耗时较长这个问题。这主要是因为有机荧光探针的合成和分离往往需要较多的步骤和较长的时间,并且这些探针和巯基化合物的作用也发生得比较慢。这个问题极大的阻碍了荧光方法在巯基化合物的检测领域的实际应用。本文准备从减少荧光方法检测巯基化合物所需时间的角度入手来建立快速检测巯基化合物的新方法,主要包括如下两种思路。第一种思路是寻找直接能够与巯基化合物作用且响应速度快的商品化荧光探针。在实验中发现了巯基化合物能使异硫氰酸荧光素荧光强度快速显著降低这一有趣现象,以此为出发点探究了影响该现象的pH,时间等条件,并且在此基础上提出了一种快速检测巯基化合物的新方法。本方法的用时非常短,在最佳条件下5分钟之内完成对巯基化合物的检测。在最佳条件下对实际样品的测试取得了很好的效果,且具有良好的选择性。对谷胱甘肽(GSH),高半胱氨酸(Hcy),半胱氨酸(Cys),二硫苏糖醇(DTT)的检测限分别达到3.08μM,2.66μM, 1.28μM,1.92μM。第二种思路是选择一种能快速合成并快速响应巯基化合物的荧光探针。基于本课题组前期的工作和文献调研发现,铜纳米簇是一种能够快速合成且对巯基化合物快速响应的优良荧光探针。而且跟金纳米簇和银纳米簇相比还具有成本低的优点。以单链DNA为模板在10分钟内成功合成出铜纳米簇,并将其应用于巯基化合物的快速检测。检测的原理是巯基化合物和铜纳米簇形成一种没有荧光的配位化合物。对铜纳米簇的合成条件进行了优化,包括DNA的碱基数、溶液的pH、合成时间、铜离子和抗坏血酸钠的比例、铜离子和DNA的比例等。在最佳条件下合成的铜纳米簇对巯基化合物具有较高的灵敏度和选择性,对半光氨酸、高半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫苏糖醇的检测范围分别是0.50μM-30.00μM、 1.5μM-32.5μM、0.50μM-30.00μM、0.50μM-25.00μM。最终利用该方法成功实现了对谷胱甘肽胶囊中的谷胱甘肽的含量的检测,达到了理想的效果。
【关键词】：巯基化合物 异硫氰酸荧光素 铜纳米簇
【学位授予单位】：南京大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：O657.3
【目录】：

• 摘要7-9
• Abstract9-11
• 第一章 绪论11-30
• 1.1 巯基化合物11-14
• 1.1.1 半胱氨酸12-13
• 1.1.2 高半胱氨酸13
• 1.1.3 谷胱甘肽13-14
• 1.1.4 二硫苏糖醇14
• 1.2 巯基化合物的检测14-22
• 1.2.1 高效液相色谱法14-15
• 1.2.2 电化学方法15-18
• 1.2.3 荧光方法18-22
• 1.3 论文选题思路22-23
• 参考文献23-30
• 第二章 快速检测巯基化合物的新方法30-40
• 2.1 引言30-31
• 2.2 实验部分31
• 2.2.1 实验药品与仪器31
• 2.2.2 实验方法31
• 2.3 结果与讨论31-38
• 2.3.1 巯基化合物对FITC的荧光淬灭31-32
• 2.3.2 最佳pH的选择32-33
• 2.3.3 反应时间的确定33-34
• 2.3.4 FITC检测巯基化合物的灵敏度34-37
• 2.3.5 FITC检测巯基化合物的选择性37
• 2.3.6 实际样品检测37-38
• 2.4 结论38
• 参考文献38-40
• 第三章 以单链DNA为模板的铜纳米簇的合成及其在巯基化合物检测中的应用40-58
• 3.1 引言40-42
• 3.2 实验部分42-43
• 3.2.1 试剂和药品42
• 3.2.2 实验仪器42-43
• 3.2.3 铜纳米簇的合成和荧光研究43
• 3.2.4 谷胱甘肽胶囊中谷胱甘肽含量的测量43
• 3.3 结果与讨论43-54
• 3.3.1 合成条件的优化43-47
• 3.3.2 铜纳米簇的性质的表征47-48
• 3.3.3 巯基化合物淬灭铜纳米簇荧光的机理48-49
• 3.3.4 铜纳米簇检测巯基化合物的灵敏度49-53
• 3.3.5 铜纳米簇检测巯基化合物的选择性53-54
• 3.3.6 实际样品检测54
• 3.4 结论54-55
• 参考文献55-58
• 附录58-59
• 致谢59-60

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

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本文编号：1097902