食品中生物胺液相色谱检测方法的建立及应用

发布时间：2017-11-12 07:31

  本文关键词：食品中生物胺液相色谱检测方法的建立及应用

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【摘要】：生物胺的过量摄入会对人体的神经系统、心血管等造成伤害,同时生物胺也是食品新鲜度潜在的评价指标,因此建立快速、灵敏、准确的生物胺定量检测方法对于保证食品安全以及人类的身体健康具有重要意义。本论文经研究建立了两种同时检测15种生物胺的液相色谱方法。一是采用在线固相萃取与毛细管高效液相色谱联用测定奶酪中的生物胺;二是采用固相萃取净化,常规高效液相检测动物源性食品中生物胺含量的方法。通过单因素变量试验,优化了在线固相萃取的主要参数,确定了操作条件:采用Zorbax SB-(C18柱(0.5 x35 mm,5μm)为固相萃取柱;用5%乙腈-水做为流动相进行等度洗脱;进样体积11μL;3 min后六通阀进行切换;实验还优化了毛细管高效液相色谱的分离条件,采用Zorbax SB-C18柱(0.5×150mm,5μm)为分析柱;用超纯水和乙腈进行梯度洗脱,流速10 μLmin-1;柱温35℃;检测波长为245 nm。15种生物胺在0.25-50.0 mg L-1范围内线性关系良好(R2≥0.9981),仪器检出限在0.02-0.10 mg L-1。在三种加标水平(1、20、4mgkg-1)下,除甲胺、乙胺、3-甲基丁胺和5-羟基色胺的测定结果偏差稍大外,其余生物胺的加标回收率在79.65-118.66%之间;除3-甲基丁胺和5-羟基色胺外,RSD在0.33-14.93%范围内,说明所建方法可以用于奶酪中生物胺含量的测定。通过单因素变量试验,优化了固相萃取操作的主要参数,优化结果为:以Waters Sep-Pak C18做为固相萃取柱,上样溶液pH=9,10%的丙酮溶液做淋洗液,洗脱剂为乙酸乙酯,洗脱体积为5mL;色谱柱为Inertsi1ODS-3C18(250x4.6mm,5μm),柱温为35℃;以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速为0.8 mLmin-1;进样体积为20μL。15种生物胺在0.02-5.0 mg L-1范围内线性(R2≥0.9990)良好,仪器的检出限在0.001-0.02 mg L-1。肉制品以及水产品样品的加标回收率在70.49-121.16%,RSD在0.71-15.99%范围内,说明所建立的方法可用于测定动物源性食品中生物胺的含量。采用建立的方法测定了猪肉和牛肉放置于不同的温度(常温、-4℃、-20℃)下贮藏不同的时间(14小时、7天、30天)下生物胺含量变化。结果表明,猪肉和牛肉中的甲胺、尸胺、组胺、5-羟基色胺及酪胺的含量变化幅度较大,基本可以认为与肉的腐败程度有关,可以作为新鲜度的指标;将肉制品放置于低温下能够显著降低生物胺的含量,这对于保障人们的健康具有重要意义。
【学位授予单位】：天津科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：O657.72;TS207.3

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本文编号：1174945