高效液相色谱在海产品中抗生素类药物分析中的应用研究

发布时间：2017-11-26 16:28

  本文关键词：高效液相色谱在海产品中抗生素类药物分析中的应用研究

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【摘要】：随着海产品的过度开发和消耗,海水集约化的现代化养殖已经成为海产品供应的重要方式,由于能够预防疾病、提高饲料报酬率和提升海鲜质量,多种抗生素被广泛使用。但抗生素在带来经济效益的同时,抗生素残留问题也愈发严重。残留抗生素在生物体内和自然环境中不断蓄积,污染环境,对人类健康造成威胁。由此,探索简便、快速、高效、环境友好型的抗生素残留检测分析方法对食品安全和环境监测具有重要意义。本文选择目前使用广泛的磺胺、喹诺酮和四环素类抗生素为待测目标物,建立了3类抗生素同时分析检测的高效液相色谱法;针对海产品的高脂肪和高蛋白特性以及抗生素的两性性质,建立QuEChERS-反相-分散液液微萃取的新方法对海产品中抗生素多残留进行快速检测。QuEChERS法(Quick,Easy,Cheap,Effective,Rugged and Safe)用于快速、有效地从海产品中萃取目标物,同时除去蛋白质;采用基于非极性体系的反相-分散液液微萃取法,以水溶液为微萃取剂,以萃取液为分散剂,对萃取液中目标物进行快速的分离富集,同时除去脂肪。(1)本实验采用高液相色谱法作为检测手段,考察了色谱柱类型、流动相的组成、流速、进样溶液的组成和洗脱梯度等色谱条件对目标物色谱行为的影响。确定最优条件为:进样溶液用初始流动相稀释;ZORBAX Eclipse XDB-C18(5μm,150 mm×4.6 mm)色谱柱;以0.5%乙酸水溶液作为流动相A,流动相B为乙腈;洗脱梯度:0-18 min,90%-82%A;18-23 min,82%-65%A;23-26 min,65%A;26-27 min,65%-90%A;27-35 min,90%A;流速为0.7 m L/min;紫外检测波长λ=280 nm。绘制了8种化合物的标准曲线,线性关系良好,线性范围在0.18-7.81μg/m L之间。建立的高效液相色谱法适用于磺胺类、喹诺酮类和四环素类化合物的快速定性定量分析。8种抗生素类化合物在26 min内全部出峰,峰形尖锐对称,分离度良好。(2)建立QuEChERS-反相-分散液液微萃取-高相液相色谱法测定海产品中磺胺类和喹诺酮类抗生素。考察了萃取剂种类和酸含量、分散剂的体积、微萃取溶剂的体积和pH值、萃取时间等条件对目标物萃取效果的影响。确定最优条件为:萃取剂为1 m L含1%乙酸的乙腈:水=8:2(V:V)溶液;所得萃取液氮吹到体积为200μL作为分散剂;微萃取剂为50μL含1%乙酸的水;环己烷体积为3 m L;萃取时间为1 min。(3)将建立的方法用于金鲳鱼、大黄花鱼、青鱼、白鲢鱼和海鲫鱼5种鱼肉样品的分析,并进行加标样品分析,验证建立的方法的样品适用性。6种抗生素线性关系良好,相关系数r在0.9951-0.9993之间。6种目标物的LOD在0.0218-0.0902μg/g范围内,LOQ为0.0725-0.3007μg/g。加标浓度在0.11-0.78μg/g时,回收率在50-108%之间。(4)建立了反相-分散液液微萃取法直接萃取高脂肪类样品(液体)中抗生素。以性质相近、便宜易得的黄油作为鱼油代替物,研究了反相-分散液液微萃取法在鱼油中抗生素萃取中应用前景。该方法具有操作简单、消耗有机溶剂少、分析时间短以及除脂肪效果好等优点,适用于海产品中抗生素的简便、快速的检测。此外,由于消除了脂肪的干扰,该方法在高脂肪类样品中极性化合物的分析很有应用前景。将不同的萃取方法与反相-分散液液微萃取联用,将进一步扩大该方法于不同基质中其他化合物的检测。
【学位授予单位】：哈尔滨工业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：O657.72;TS254.7
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本文编号：1230440