PEG-PAEs聚合物胶束共载阿霉素与适配体用于癌症的靶向治疗

发布时间：2018-12-11 18:17

【摘要】：化疗仍然是癌症治疗的主要策略之一。然而,非靶向的化疗药物会在全身蓄积,对正常的体细胞造成极大的损害。靶向药物传递系统(targeting drug delivery system,TDDS)作为一种新的给药手段,在抗肿瘤药物传递中显示出良好的成效。针对纳米粒给药系统的靶向配体功能化可以增强药物的选择性,减少药物的用量以及增加肿瘤部位的血药浓度,具有巨大的应用前景。纳米载体如何在特定的肿瘤组织和细胞中释放药物是纳米体系有效应用所面临的又一突出问题。用刺激响应性材料制备成的纳米系统具有优异性能,他们可以绕过生物屏障以实现有针对性的细胞内药物传递。其中,pH响应性的纳米粒作为药物输送载体用于肿瘤治疗倍受关注。本文制备了同时具有靶向功能以及pH响应性能的TDDS,并对此递药体系的理化特性及抗肿瘤效果进行了研究。论文的主要研究工作如下:1.载体的合成与表征:采用迈克尔加成反应制备了聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)和聚(β-氨基酯)(poly(β-amino esters),PAEs)的两亲性嵌段共聚物(PEG-PAEs)。核磁共振氢谱(1H-NMR)、凝胶渗透色谱(gel-permeation chromatography,GPC)及气相色谱(gas chromatography,GC)验证结果表明,我们成功合成了PEG-PAEs,平均分子量为9237 Da,多分散系数为1.19,有机残留量符合药典规定。2.载药胶束的制备与表征:通过透析法制备了空白胶束(blank micelles,BMs)与包载阿霉素(doxorubicin,DOX)的单载纳米粒(PEG-PAEs/DOX nanoparticles,PDNs),静电吸附法制备了包载DOX与核酸适配体(aptamer,Apt)的共载纳米粒(PEG-PAEs/DOX/Apt nanoparticles,PDANs)。BMs的临界胶束浓度为6.3μg/m L,且具有良好的pH响应性;PDANs的粒径分布均匀,分散性良好,平均粒径和Zeta电位分别为183.1±27.2 nm和+31.2±6.3 m V,Apt与PDNs结合牢固;载药性能考察结果表明,DOX的载药量和包封率较高,分别为9.81%和75.19%;体外释放结果表明,随着pH的下降,药物的累计释放率逐渐增加,显示了pH依赖的释放性能。3.生物相容性研究:从细胞水平以及动物水平对载体材料的生物相容性进行研究。采用溶血试验以及CCK-8法考察了BMs的溶血性能及细胞毒性,结果表明,在用药浓度范围内,材料无溶血作用,且细胞毒性等级为0或1级,具有良好的生物相容性;小鼠的全身急性毒性实验表明,BMs对小鼠无明显急性毒性作用。4.靶向性能与抗癌效果研究:从细胞水平以及分子水平对PDANs的靶向性能及抗癌效果进行研究。药物细胞内的分布情况表明,药物作用4 h后即可进入细胞内,且药物在肿瘤细胞内的荧光强度远远高于在正常细胞内的荧光强度,显示了良好的靶向功能性;细胞形态学变化结果表明,经载体负载的药物可以更有效地促进肿瘤细胞的凋亡进程;体外抑瘤效果结果表明,PDANs组在低浓度下即可显示出较强的细胞毒性,并且对肿瘤细胞有较好靶向功能性;细胞周期分布结果表明,PDNs和PDANs作用后使肿瘤细胞的细胞周期滞留于G0/G1后期;荧光定量PCR结果表明,PDANs抑制了Bcl-2 m RNA的表达,发挥了明显的基因治疗效果。综上所述,这种具有主动靶向功能以及pH响应性能的纳米粒子有望作为新型的TDDS,应用于乳腺癌的靶向治疗领域。
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【学位授予单位】：华侨大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：O631;TQ460.1
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本文编号：2373006