HPLC法同时测定金钱草药材中芦丁和烟花苷的含量

发布时间：2019-07-18 15:34

【摘要】：目的建立同时测定金钱草(Lysimachia christinae)中芦丁和烟花苷含量的HPLC方法。方法Shiseido CAPCELL PAK C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:以乙腈A-质量分数0.4%磷酸溶液为流动相B,进行A∶B=35∶65等度洗脱,流速:1.0 mL·min~(-1),检测波长:365 nm,柱温:25℃。结果芦丁和烟花苷的线性分别为8.818×10~(-2)~4.409×10~(-1)μg和4.072×10~(-2)~2.036×10~(-1)μg,相关系数r分别为0.999 7和0.999 6,芦丁平均回收率为100.4%,RSD=1.5%,烟花苷平均回收率为99.8%,RSD=1.3%。各组分基线分离,无其他组分峰影响。结论所用方法专属性好,准确、重复性好,可作为金钱草水提工艺的质量控制的方法之一。
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图片说明：为10μL。结果见图1。Fig．1Thestructuresofrutin(a)andkaempferol3-O-rutinoside(b)图1芦丁(a)和烟花苷(b)的化学结构式2.2对照品溶液的制备精密量取芦丁和烟花苷对照品，以体积分数70%甲醇溶液制成质量浓度分别为88.2mg·L－1、40.7mg·L－1的芦丁与烟花苷的对照品溶液。2.3供试品溶液的制备取金钱草药材粉碎过药典三号筛，精密称定3g，置具塞锥形瓶中，精密加入体积分数为70%甲醇水溶液50mL，称定质量，超声处理(功率280W，频率40kHz)1h，放冷，再称定质量，用体积分数为70%甲醇水溶液补足减失的质量，滤过，精密量取25mL续滤液，置蒸发皿中，蒸干，残渣加水10mL使溶解，通过聚酰胺柱(内径1.5cm，柱高12cm)，以水50mL洗脱，弃去水液，用乙醇100mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加适量70%甲醇溶解，转移到5mL量瓶。2.4芦丁标准曲线的绘制分别精密称劝2.2”条下所得混合对照品储备液1、2、3、4和5mL，置于5个10mL量瓶中，用体积分数为70%的甲醇水溶液稀释至刻度，摇匀，分别进样10μL，测定，以进样量m(μg)为横坐标，芦丁色谱峰面积A为纵坐标，并按最小二乘法计算直线回归方程，，得A=1.892×106m－3.019×104(r=0.9996)。结果证明，芦丁进样量在8.818×10－2～4.409×10－1μg范围内，与峰面积呈良好的线性关系。其结果分别见图2和表1。A—Ｒutin+Kaempferol-3-O-rutinoside;B—SampleFig．2HPLCChromatogramsofrutinandkaempferol-3-O-rutinosideinL.christinae图2金钱草中芦丁和烟花苷的高效液相色谱图Table1Thelinearrangeofrutin表1芦丁的线性范围m/μg8.818×10－21.764×10－12.645×10－13.527×10－14.409×10－1A1.428×1053.029×1054.624×1056.3
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图片说明：液，用乙醇100mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加适量70%甲醇溶解，转移到5mL量瓶。2.4芦丁标准曲线的绘制分别精密称劝2.2”条下所得混合对照品储备液1、2、3、4和5mL，置于5个10mL量瓶中，用体积分数为70%的甲醇水溶液稀释至刻度，摇匀，分别进样10μL，测定，以进样量m(μg)为横坐标，芦丁色谱峰面积A为纵坐标，并按最小二乘法计算直线回归方程，得A=1.892×106m－3.019×104(r=0.9996)。结果证明，芦丁进样量在8.818×10－2～4.409×10－1μg范围内，与峰面积呈良好的线性关系。其结果分别见图2和表1。A—Ｒutin+Kaempferol-3-O-rutinoside;B—SampleFig．2HPLCChromatogramsofrutinandkaempferol-3-O-rutinosideinL.christinae图2金钱草中芦丁和烟花苷的高效液相色谱图Table1Thelinearrangeofrutin表1芦丁的线性范围m/μg8.818×10－21.764×10－12.645×10－13.527×10－14.409×10－1A1.428×1053.029×1054.624×1056.308×1058.132×1052.5烟花苷标准曲线的绘制分别精密称劝2.2”条下所得混合对照品储备液1、2、3、4和5mL，置于5个10mL量瓶中，用体积分数为70%的甲醇水溶液稀释至刻度，摇1068沈阳药科大学学报第34卷
【作者单位】：武警四川省消防总队医院;重庆市食品药品检验检测研究院;沈阳药科大学基于靶点的药物设计与研究教育部重点实验室;
【分类号】：O657.72;R284.1

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