分子印迹固相萃取技术对六堡茶中表儿茶素的分离特性
【图文】:
取80μL混合溶液至200μL移液枪枪头中,充氮除氧10min,密封枪头两端。将处理好的枪头放入55℃恒温水浴锅中加热24h,加热结束后取出枪头得到图1A所示的MISPE小柱,枪头前端白色固体即为MIPs。将注射器与SPE小柱相连接如图1B所示,用甲醇-冰乙酸(9∶1,,V/V)混合溶液冲洗聚合物以去除MIPs中的模板分子,至洗脱液中检测不到模板分子时停止洗脱。再用甲醇溶液对其进行二次洗脱,以除去残留在萃取柱上的冰乙酸。最后将其放入鼓风干燥箱内60℃真空干燥24h,将得到的聚合物枪头放入干燥器中备用。A.枪头SPE柱B.SPE装置图1SPE柱效果图Fig.1Solidphaseextractioncolumn
鈉屑觳狻?1.3.5样品处理将六堡茶干茶叶放入中药材粉碎机粉碎至粉末。取出适量茶叶粉末溶于乙醇溶剂,在85℃水浴条件下索氏提取4h,实验结束后将提取液倒入蒸发皿中,放入烘箱烘干备用。2结果与分析2.1聚合条件优化OHCHOHOHOHCHCH2CH2CH2OOOOOOOOOOOOOOOOOOOHOOHOHHOHOHCHCHOHCHOHCHCHOH2NH2CH2NH2NH2NNH2H2CNH2NH2NH2NH2NH2NH2H2NNH2542hGDMAEIBNA图2表儿茶素分子印迹过程示意图Fig.2SchematicillustrationofmolecularlyimprintingofL-epicatechin表儿茶素MISPE柱的特异性吸附性能与聚合物的组成、比例等条件密切相关。对模板分子而言,选择合适功能单体是直接影响SPE柱吸附性能的关键。如图2所示,由于表儿茶素分子中4个羟基基团都可以形成氢键位点,而AM中含有的羰基基团,易与表儿茶素分子中的多个羟基基团以氢键相结合,因此选用表儿茶素作为模板分子,AM作为功能单体,并对模板分子、功能单体与交联剂之间的配比进行优化与考察,以改善聚合物吸附及选择性能。有文献[17-25]报道,模板分子和功能单体比例一般为1∶4或1∶6,因为在此比例条件下模板分子和功能单体的结合量最大。为了考察模板分子、功能单体、交联剂间配比对模板分子回收率的影响,对制备的8种聚合物进行回收率分析,如表2所示。表2不同比例对聚合物模板分子回收率的影响Table2Effectoftemplatetofunctionalmonomertocross-linkingagentratioontemplaterecovery聚合物物质的量比MIPs回收率/%NMIP回收率/%Q模板分子∶功能单体∶交联剂P11∶2∶4063.0118.533.40P21∶4∶4075.811
【作者单位】: 广西科技大学生物与化学工程学院广西糖资源绿色加工重点实验室;广西科技大学医学院;
【基金】:广西自然科学基金项目(2014GXNSFAA118402) 广西高等学校高水平创新团队及卓越学者计划资助项目
【分类号】:TS272.5;O658.2
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本文编号:2553111
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