液相色谱—串联质谱法测定婴幼儿配方食品中左旋肉碱和胆碱含量及应用研究

发布时间：2020-07-17 20:52

【摘要】：婴幼儿在生长发育过程中,对维生素、蛋白质、微量元素等营养元素的需求量较高,左旋肉碱和胆碱都是婴幼儿生长发育所必须的水溶性营养元素,新生儿由于自身合成能力不足,所以必须依靠外源摄入来补充。母乳可以为婴幼儿提供生长所需的左旋肉碱和胆碱,但在母乳不足的时候,则需要通过婴幼儿配方食品,尤其是乳粉来进行补充。因此,婴幼儿配方食品中必须添加这两种营养成分。目前国标中分别采用酶显色法和雷氏盐比色法检测这两种物质,缺点是无法实现精准定性确证,在定量检测过程中检出限较高,且样品制备过程复杂、操作时间较长,不适合快速批量检验。基于以上背景本文建立了同位素内标-液相色谱-串联质谱法同时检测这两种水溶性营养元素的分析方法,实验结果如下:样品经温水溶解混匀后加入同位素内标,经盐酸、超声提取后,用甲酸水-乙腈稀释并沉淀蛋白,经过0.2μm滤膜后,采用Agilent HILIC色谱柱(3.5μm,100 mm×2.1 mm)进行分离,柱温为35℃,流速为0.3 mL/min,进样量为2μL,梯度洗脱条件进行分离,采用多反应监测模式(MRM)进行定性、定量分析,同位素内标进行校正。实验结果表明,左旋肉碱及其内标物在0.005~0.100 mg/L范围内、胆碱及其内标物在0.025~0.500 mg/L范围内线性关系良好(标准品);左旋肉碱的回收率在87.7%~101.0%之间,胆碱回收率在80.6%~105.0%之间;相对标准偏差(RSD)左旋肉碱3.48%、胆碱8.58%;检出限(LOD)左旋肉碱为1.5 mg/kg、胆碱为6.0 mg/kg;定量限(LOQ)左旋肉碱为4.5 mg/kg、胆碱为18.0 mg/kg(样品)。采用建立的液相色谱-串联质谱法分别对乳基和豆基婴幼儿配方粉样品进行含量检测、极限运输条件实验和模拟冲泡实验。被测不同品牌婴幼儿配方粉样品中左旋肉碱和胆碱的实际检测值都达到了标签上含量的80%左右;通过极限运输条件实验得出:婴幼儿配方食品在运输周期较长的情况下,最佳储存温度为25℃;在运输周期较短的情况下,最佳储存温度为0℃~37℃;通过模拟冲泡条件实验得出:婴幼儿配方粉的最佳冲泡温度为40℃,并且冲泡后应立即饮用,若冲泡后不能立即饮用,需在冷藏条件下储存,且存放时间不宜超过72h。
【学位授予单位】：大连工业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：TS216;O657.63
【图文】：

分子结构图,分子结构,β-氧化,长链

图 1-1 左旋肉碱的分子结构Fig. 1-1Molecular structure of L-Carnitine生理功能肪代谢分解重要的功能是可以帮助脂肪代谢，促进脂肪酸氧化分为长链脂肪的载体，将长链脂肪运送到线粒体细胞膜生β-氧化进入三羧酸循环，从而产生能量并起到降低机体耐受力的作用。整个过程需要肉碱酰基转移酶Ⅰ共同催化完成。可利用的酰基肉碱量决定β-氧化的速脂肪的氧化速度，提高脂肪能量的利用率[5]。近年来酸的氧化也具有一定的作用。粒体内丙酮酸激酶的活性

胆碱,分子结构式

确认识到胆碱的对于人类和动物生长的营养价胆碱列为允许添加于婴儿食品的产品；1998titute of Medicine, TOM)将胆碱归类为必需营养ce Intakes, DRIs)和人类适宜摄入量(Adequate 为 425 mg/d，可耐受最高摄入量(Tolerable Upp成了人类食品和动物饲料中常用的添加剂。化性质 2-羟基-N,N,N-三甲基乙铵，分子式为 C5H15N图 1-2。胆碱主要存在于豆类、动物的脑、心色粘稠、味苦的白色浆液，不易结晶。易溶于剂。胆碱具有很强的吸湿性，暴露于空气中能定的结晶盐形式存在，如氯化胆碱。胆碱耐高

优化实验,胆碱,处理过程

此在前处理过程中，样品在经过盐酸和超声提取后调节pH，通过检测平行样品峰面积的平均值来确定最佳前处理条件，具体条件如表2-7所示。实验结果如图2-1和2-2所示，在前处理过程中，样品的pH值对左旋肉碱的检测结果没有显著的影响；在对胆碱的检测过程中发现，将pH值调节至4后直接定容会使胆碱的检测值明显下降，因此为提高检测效率，样品在前处理过程中选择不调节pH。

【参考文献】