核酸适配体试纸条法快速检测黄曲霉毒素B1残留

发布时间：2020-12-04 01:32

　　本文建立了一种新型的基于核酸适配体的试纸条快速检测技术,并首次用于水中的黄曲霉毒素B1的检测,该技术的实现主要基于黄曲霉毒素B1和DNA探针对适配体的竞争反应。核酸适配体是人工合成的单链DNA或RNA,能与多种物质特异性结合且特异性强,利用核酸适配体代替传统胶体金侧流免疫层析技术中的抗原抗体,可以使试纸条快速检测技术的应用范围更广,灵敏度更高;纳米金粒子在大量聚集时呈现红色,肉眼可见,即可以实现试纸条的现场实时检测。（1）纳米金粒子的制备和纳米金粒子与核酸适配体的偶联。本实验通过Frens法制备纳米金粒子,考察了转速、反应时间和还原剂添加量,并利用紫外光谱法、透射电子显微镜等手段进行纳米金粒子的表征。核酸适配体末端修饰巯基,巯基可以与纳米金粒子形成共价键,在纳米金粒子与核酸适配体偶联时利用柠檬酸三钠并调节pH的方法,将偶联的时间从使用氯化钠陈化的1-2天缩短为3-4个小时,并利用热重分析核酸适配体在纳米金粒子表面上的连接量在7 wt%左右。（2）试纸条优化并检测黄曲霉毒素B1。本试验考察了纳米金-核酸适配体添加量、封闭剂、硝化纤维膜和链霉亲和素的种类,并通过免疫色谱读取仪测定吸光度,最... 

【文章来源】：北京化工大学北京市 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：94 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

一核酸适配体筛选流程

？?３＾?Ｗ＂??Ｗ?ｍ??图１－２核酸适配体筛选流程??Ｆｉｇ．?１－２?Ａａｐｔａｍｅｒ?ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ?（ＳＥＬＥＸ）?ｐｒｏｃｅｓｓ??３??

?凝血酶?可卡因?赭曲靈毒素??图１－３核酸适配体的目标物??Ｆｉｇ．?１－３?Ａｐｔａｍｅｒ?ｔａｒｇｅｔｓ??１．２．３核酸适配体的应用??由于核酸适配体可以和多种物质发生结合并相互作用，近年来利用核酸适配体和纳米材??料组合，各种基于核酸适配体的生物测定包括荧光，比色和电化学等方法已经开发并且广泛??地用于令人印象深刻的多种临床，医学，环境监测应用和食品分析［２３＿２５］。核酸适配体连接荧??光分子组成荧光传感器，连接纳米金粒子组成比色传感器［２６］，和链霉亲和素的芯片相连组成??电化学传感器。作为一个小尺寸的非免疫原性分子，适配体和其官能产品己广泛用于靶向药??物递送，分子诊断，成像和临床实践中的跟踪系统，生物传感器系统，及生物标志物发现［２７］。??Ｒｉｃｈａ等人总结了核酸适配体传感器在食品检测方面的应用［２８］。??４??


本文编号：2896797