新型功能化核酸探针的设计及生物传感应用
发布时间：2020-12-11 15:46
生物传感与生物分析是通过特定的生物识别元件和信号转导方式将目标物的识别转换为可测量的信号报告出来,进而实现生物分子含量或功能的评估,不仅推进了分析化学与生命科学的科学研究,而且大大的推动了以分子特征变化为基础的临床诊断的发展。由于具有多元化的识别机制、灵活的信号转导和信号输出方式,一系列多重功能化的核酸探针已经被构建,并在生物传感与生物分析领域得到了广泛的应用。在众多信号输出方式中,荧光信号由于灵敏性高以及便于细胞内生物分子的原位分析而受到研究者们的重视。本论文致力于基于新型功能化核酸探针的设计及其荧光生物传感应用,通过对已经报道的核酸探针进行总结,发现随着核酸探针的深入应用,逐渐的暴露出了一些不足和新的挑战:1)如何克服需要荧光团和淬灭团双重标记或染料的非特异性吸附引起的假阳性响应;2)如何避免一个传感系统中需要设计多个核酸探针及伴随的非特异性扩增问题;3)如何满足复杂体系中痕量生物分子的分析,尤其是单细胞水平的分析;4)如何构建活细胞内生物分子响应的逻辑分析平台,用于不同表型癌细胞的准确分型?本论文基于以上问题和挑战,开发了一系列新型的功能化核酸探针,并将其用于疾病相关的DNA片段...
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：167 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．２分子信标的工作原理６??
取代探针??取代探针通常是由两条互补的ＤＮＡ序列组成的双链杂交体，如图１．５光团和淬灭团分别标记在两条ＤＮＡ序列的末端，并且相互靠近，荧状态。当目标物存在时，目标序列与荧光团标记的ＤＮＡ序列杂交，通，形成更稳定的双链杂交体，同时将淬灭团标记的ＤＮＡ序列置换下光团和淬灭团远离，荧光恢复，从而实现对目标序列的检测８，３７，３８。??取代探针的工作原理是基于竞争结合，通过更稳定的复合物的形成，改构成，产生信号。因此，人们将核酸适体与特定分子的识别与链取代探理结合，开发了核酸适体链取代探针，并将其用于蛋白质、小分子等生检测Ｉ２，３Ｗ２。如图１．６所示，Ｌｉ课题组１２设计了一种核酸适体链取代探针了该探针能够用于蛋白质和小分子的检测。该探针由三条ＤＮＡ链组核酸适体序列和延伸序列组成，适体序列与另一条淬灭团标记的ＤＮＡ
取代探针??取代探针通常是由两条互补的ＤＮＡ序列组成的双链杂交体，如图１．５光团和淬灭团分别标记在两条ＤＮＡ序列的末端，并且相互靠近，荧状态。当目标物存在时，目标序列与荧光团标记的ＤＮＡ序列杂交，通，形成更稳定的双链杂交体，同时将淬灭团标记的ＤＮＡ序列置换下光团和淬灭团远离，荧光恢复，从而实现对目标序列的检测８，３７，３８。??取代探针的工作原理是基于竞争结合，通过更稳定的复合物的形成，改构成，产生信号。因此，人们将核酸适体与特定分子的识别与链取代探理结合，开发了核酸适体链取代探针，并将其用于蛋白质、小分子等生检测Ｉ２，３Ｗ２。如图１．６所示，Ｌｉ课题组１２设计了一种核酸适体链取代探针了该探针能够用于蛋白质和小分子的检测。该探针由三条ＤＮＡ链组核酸适体序列和延伸序列组成，适体序列与另一条淬灭团标记的ＤＮＡ
【参考文献】：
期刊论文
[1]Sensitive detection of DNA methyltransferase activity based on rolling circle amplification technology[J]. Pei Liu,Xiao-Hai Yang,Qing Wang,Jing Huang,Jian-Bo Liu,Ying Zhu,Lei-Liang He,Ke-Min Wang. Chinese Chemical Letters. 2014(07)
本文编号：2910800
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：167 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．２分子信标的工作原理６??
取代探针??取代探针通常是由两条互补的ＤＮＡ序列组成的双链杂交体，如图１．５光团和淬灭团分别标记在两条ＤＮＡ序列的末端，并且相互靠近，荧状态。当目标物存在时，目标序列与荧光团标记的ＤＮＡ序列杂交，通，形成更稳定的双链杂交体，同时将淬灭团标记的ＤＮＡ序列置换下光团和淬灭团远离，荧光恢复，从而实现对目标序列的检测８，３７，３８。??取代探针的工作原理是基于竞争结合，通过更稳定的复合物的形成，改构成，产生信号。因此，人们将核酸适体与特定分子的识别与链取代探理结合，开发了核酸适体链取代探针，并将其用于蛋白质、小分子等生检测Ｉ２，３Ｗ２。如图１．６所示，Ｌｉ课题组１２设计了一种核酸适体链取代探针了该探针能够用于蛋白质和小分子的检测。该探针由三条ＤＮＡ链组核酸适体序列和延伸序列组成，适体序列与另一条淬灭团标记的ＤＮＡ
取代探针??取代探针通常是由两条互补的ＤＮＡ序列组成的双链杂交体，如图１．５光团和淬灭团分别标记在两条ＤＮＡ序列的末端，并且相互靠近，荧状态。当目标物存在时，目标序列与荧光团标记的ＤＮＡ序列杂交，通，形成更稳定的双链杂交体，同时将淬灭团标记的ＤＮＡ序列置换下光团和淬灭团远离，荧光恢复，从而实现对目标序列的检测８，３７，３８。??取代探针的工作原理是基于竞争结合，通过更稳定的复合物的形成，改构成，产生信号。因此，人们将核酸适体与特定分子的识别与链取代探理结合，开发了核酸适体链取代探针，并将其用于蛋白质、小分子等生检测Ｉ２，３Ｗ２。如图１．６所示，Ｌｉ课题组１２设计了一种核酸适体链取代探针了该探针能够用于蛋白质和小分子的检测。该探针由三条ＤＮＡ链组核酸适体序列和延伸序列组成，适体序列与另一条淬灭团标记的ＤＮＡ
【参考文献】：
期刊论文
[1]Sensitive detection of DNA methyltransferase activity based on rolling circle amplification technology[J]. Pei Liu,Xiao-Hai Yang,Qing Wang,Jing Huang,Jian-Bo Liu,Ying Zhu,Lei-Liang He,Ke-Min Wang. Chinese Chemical Letters. 2014(07)
本文编号：2910800
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