流动注射化学发光免疫传感器结合酶放大策略在环境污染与食品安全领域的应用
发布时间：2021-02-21 00:54
随着人民生活水平和消费观念的不断提升,“绿色健康”已经逐步成为大众精神物质追求的代名词,与此同时食品与环境安全问题引发国民热议。为了能够灵敏又精准地检测环境污染物与食品违禁添加剂,开发一种高效的分析检测方法为大势所趋。流动注射化学发光分析法是一种响应快、操作简便和灵敏度高的检测方法,该法已被广泛应用于医药、食品、环境、农药等与生活息息相关的领域。为了提高该分析检测方法的特异性,将其与免疫分析联用,利用抗原抗体反应为基础,构建流动注射化学发光免疫分析法,极大地扩宽了两者的实际应用价值。在此基础上,本论文提出了一系列在食品违禁添加剂和环境污染物检测的信号放大策略,构建的几种传感器成功用于检测水样以及食品安全领域违禁添加的小分子有害物质——溴布特罗、氯霉素和汞离子,为食品安全和环境污染的研究和应用提供了有效的分析方法。本论文主要包括以下几个方面:一、以羧基树脂珠为固相载体连接抗原,因其具有较大的比表面积及较好的生物相容性,可负载大量抗原。引入高亲和力的多抗与辣根过氧化物酶标记的二抗,可有效地放大化学发光信号,该方法对溴布特罗检测的线性范围为0.001-300 ng mL-1。成功建立了线性范...
【文章来源】：苏州大学江苏省
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１?－３化学发光成像纳米酶免疫测定示意图??
第一章?流动注射化学发光免疫传感器结合酶放大策略在环境污染与食品安全领域的应用??用于微囊藻毒素－ＬＲ的灵敏检测，如图１４所示。基于间接竞争ＣＬ免疫测定原理，??使用光纤生物探针作为生物识别元件，实现了对微囊藻毒素－ＬＲ的高灵敏检测。在最??佳条件下，微囊藻毒素－ＬＲ的检出限为０．０３?ｐｇ！／１。??Ｉ?ｉ?ｖ?＾??Ｓ?＾?Ｓ?Ｘ?＾??ＩｃＳｖｖ??—－?Ｗａ＞ｈｏｄ?ｂ＞?Ｐｎ．Ｓ??ＩＶ?Ｒｅ＾ｅｃｅｒａ＇．ｉｕｕ?＇ｏｙ?０．５＊－＊?ＳＤＳ?人?Ｙ人?ＪＬ?１?；??必人??ｍ?ｋ?ｋ?＾?Ｖ??／ｖｙｖ?／＼?，Ｎ?产、．？＾＞－?Ｗａｓｈｅｄ?ｈｙ?ＰＫＳ??＂??令??‘?ＭＣ－ＩＲ－ＯＶＡ?＾１?ＭＣ－ＬＲ?｝ｆ．?ＨＲＰ??ａｎｔｉ－ＭＣ＊－ＬＲ?ａｎｔｉｂｏｄｙ?＝＾，?ＨＲ？－ｃｏｎｊｕｇａｌｅｄ?ｇｏａｌ－ａｎｉｉ－ｍｎｕ＾ｃ?ａｎｔｉｂｏｄｙ??图１４微囊藻毒素－ＬＲ检测的ＣＬ免疫感应机制示意图??１．３．３化学发光免疫传感器??将高灵敏度的传感器技术与特异性免疫反应相结合，用于监测抗原－抗体反应的??生物传感器称作免疫传感器［４１］。结合抗体－抗原相互作用和敏感化学发光测量值的化??学发光免疫传感器是当下流行的光学免疫传感器，可以快速产生和读取信号、大大简??化免疫测定步骤、降低诊断成本，并且可以使检测小型化和自动化。??化学发光免疫分析方法由于具有无放射性废物，所需仪器相对简单便携，检测限??低以及检测动态范围宽等优点而被用于常规临床分析以及临床和生物医学研宄，它对??许多不同的方法都具有通用性和灵活性。通常，在分析中使用两种主要的化学发光分??析技
流动注射化学发光免疫传感器结合酶放大策略在环境污染与食品安全领域的应用?第一章??ｗｉｔｃ、??Ｍｕｌｔｉｐｏｓｉｔｉｏｎ＾ａｌｕｅ＾，?ｆ．．．．（Ｌ?Ｊ?＼?＿?＿??ＣＬ?ｆｏｒ?ＡＦＰ?ＣＬｆｏｒＣＥＡ??ＴＴ??？?ＡＦＰ?ａｎｔｉｇｅｎ?Ｙ?ａｎｔｉ－ＡＦＰ?ｙ?ＨＲＰ－Ｌａｂｅｌｅｄ－ＡＦＰ??？?ＣＥＡ?ａｎｔｉｇｅｎ?ａｎｔｉ－ＣＥＡ?ｒ?ＨＲＰ－Ｌａｂｅｌｅｄ－ＣＥＡ??典?ＧＯ?＜Ｚａ＞?Ｆｅ３０４／Ｓｉ０２??图１?－５基于氧化石墨烯固定酶标抗体得ＡＦＰ和ＣＥＡ的信号放大免疫检测??１．５．２环境中农药残留检测??敌百虫是一种重要的有机磷农药，在极高的暴露水平下会过度刺激神经系统，并??导致严重的疾玻山东农业大学Ｘｕ课题组［５９］基于分子印记聚合物ＭＩＰ作为仿生抗体，??以牛血清白蛋白为载体，用敌百虫间接标记敌百虫半抗原，后者与游离敌百虫竞争ＭＩＰ??仿生抗体的结合位点。基于这种直接竞争形式，开发了一种用于快速检测痕量敌百虫??的高通量流动注射化学发光仿生免疫测定方法。在最佳条件下，使用此方法可获得??０．００２４?ｍｇ?Ｉ／１的检测下限。该方法还用于检测胡萝卜和卷心菜样品中的敌百虫加标含??量，并通过气相色谱法验证实验结果。??１．５．３其他物质的分析??除上述介绍外，ＦＩ－ＣＬＩＡ分析在其他方面也有诸多应用，如扬州大学Ｙａｎｇ课题组??基于共固定捕获抗体和天然酶策略的无标记化学发光免疫分析检测生物蛋白，将人类??免疫球蛋白捕获抗体与ＨＲＰ共固定于金纳米粒子和壳聚糖薄膜表面，所形成的界面可??以防止化学发光底物向酶的扩散，进而导致化学发光强度的降低，随之进行定量检测。??扬州大学
【参考文献】：
期刊论文
[1]基于氧化石墨烯信号放大的化学发光法联合检测甲胎蛋白和癌胚抗原[J]. 林洁华,张慧慧,楚鹏飞. 化学学报. 2012(22)
本文编号：3043604
【文章来源】：苏州大学江苏省
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１?－３化学发光成像纳米酶免疫测定示意图??
第一章?流动注射化学发光免疫传感器结合酶放大策略在环境污染与食品安全领域的应用??用于微囊藻毒素－ＬＲ的灵敏检测，如图１４所示。基于间接竞争ＣＬ免疫测定原理，??使用光纤生物探针作为生物识别元件，实现了对微囊藻毒素－ＬＲ的高灵敏检测。在最??佳条件下，微囊藻毒素－ＬＲ的检出限为０．０３?ｐｇ！／１。??Ｉ?ｉ?ｖ?＾??Ｓ?＾?Ｓ?Ｘ?＾??ＩｃＳｖｖ??—－?Ｗａ＞ｈｏｄ?ｂ＞?Ｐｎ．Ｓ??ＩＶ?Ｒｅ＾ｅｃｅｒａ＇．ｉｕｕ?＇ｏｙ?０．５＊－＊?ＳＤＳ?人?Ｙ人?ＪＬ?１?；??必人??ｍ?ｋ?ｋ?＾?Ｖ??／ｖｙｖ?／＼?，Ｎ?产、．？＾＞－?Ｗａｓｈｅｄ?ｈｙ?ＰＫＳ??＂??令??‘?ＭＣ－ＩＲ－ＯＶＡ?＾１?ＭＣ－ＬＲ?｝ｆ．?ＨＲＰ??ａｎｔｉ－ＭＣ＊－ＬＲ?ａｎｔｉｂｏｄｙ?＝＾，?ＨＲ？－ｃｏｎｊｕｇａｌｅｄ?ｇｏａｌ－ａｎｉｉ－ｍｎｕ＾ｃ?ａｎｔｉｂｏｄｙ??图１４微囊藻毒素－ＬＲ检测的ＣＬ免疫感应机制示意图??１．３．３化学发光免疫传感器??将高灵敏度的传感器技术与特异性免疫反应相结合，用于监测抗原－抗体反应的??生物传感器称作免疫传感器［４１］。结合抗体－抗原相互作用和敏感化学发光测量值的化??学发光免疫传感器是当下流行的光学免疫传感器，可以快速产生和读取信号、大大简??化免疫测定步骤、降低诊断成本，并且可以使检测小型化和自动化。??化学发光免疫分析方法由于具有无放射性废物，所需仪器相对简单便携，检测限??低以及检测动态范围宽等优点而被用于常规临床分析以及临床和生物医学研宄，它对??许多不同的方法都具有通用性和灵活性。通常，在分析中使用两种主要的化学发光分??析技
流动注射化学发光免疫传感器结合酶放大策略在环境污染与食品安全领域的应用?第一章??ｗｉｔｃ、??Ｍｕｌｔｉｐｏｓｉｔｉｏｎ＾ａｌｕｅ＾，?ｆ．．．．（Ｌ?Ｊ?＼?＿?＿??ＣＬ?ｆｏｒ?ＡＦＰ?ＣＬｆｏｒＣＥＡ??ＴＴ??？?ＡＦＰ?ａｎｔｉｇｅｎ?Ｙ?ａｎｔｉ－ＡＦＰ?ｙ?ＨＲＰ－Ｌａｂｅｌｅｄ－ＡＦＰ??？?ＣＥＡ?ａｎｔｉｇｅｎ?ａｎｔｉ－ＣＥＡ?ｒ?ＨＲＰ－Ｌａｂｅｌｅｄ－ＣＥＡ??典?ＧＯ?＜Ｚａ＞?Ｆｅ３０４／Ｓｉ０２??图１?－５基于氧化石墨烯固定酶标抗体得ＡＦＰ和ＣＥＡ的信号放大免疫检测??１．５．２环境中农药残留检测??敌百虫是一种重要的有机磷农药，在极高的暴露水平下会过度刺激神经系统，并??导致严重的疾玻山东农业大学Ｘｕ课题组［５９］基于分子印记聚合物ＭＩＰ作为仿生抗体，??以牛血清白蛋白为载体，用敌百虫间接标记敌百虫半抗原，后者与游离敌百虫竞争ＭＩＰ??仿生抗体的结合位点。基于这种直接竞争形式，开发了一种用于快速检测痕量敌百虫??的高通量流动注射化学发光仿生免疫测定方法。在最佳条件下，使用此方法可获得??０．００２４?ｍｇ?Ｉ／１的检测下限。该方法还用于检测胡萝卜和卷心菜样品中的敌百虫加标含??量，并通过气相色谱法验证实验结果。??１．５．３其他物质的分析??除上述介绍外，ＦＩ－ＣＬＩＡ分析在其他方面也有诸多应用，如扬州大学Ｙａｎｇ课题组??基于共固定捕获抗体和天然酶策略的无标记化学发光免疫分析检测生物蛋白，将人类??免疫球蛋白捕获抗体与ＨＲＰ共固定于金纳米粒子和壳聚糖薄膜表面，所形成的界面可??以防止化学发光底物向酶的扩散，进而导致化学发光强度的降低，随之进行定量检测。??扬州大学
【参考文献】：
期刊论文
[1]基于氧化石墨烯信号放大的化学发光法联合检测甲胎蛋白和癌胚抗原[J]. 林洁华,张慧慧,楚鹏飞. 化学学报. 2012(22)
本文编号：3043604
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