核酸适配体应用于环丙氨嗪快速检测新方法研究

发布时间：2021-03-27 00:04

　　环丙氨嗪是一种三嗪类化合物,作为饲料添加剂被广泛应用于畜牧养殖业。它在环境中具有迁移性,可以进入人体内,对人体健康产生影响。环丙氨嗪在动物和植物体内可通过脱烷基作用代谢为三聚氰胺,长期摄入三聚氰胺会导致肾结石和肾衰竭。2008年毒奶粉事件后三聚氰胺被广泛关注,然而大众忽略了对三聚氰胺的代谢原药环丙氨嗪的关注。随着政府后续对奶制品检测范围的扩大,环丙氨嗪才逐渐进入了人们的视线。如今,在牛奶出厂前都要按照国家标准严格的检测牛奶中环丙氨嗪和三聚氰胺的残留量,而出厂前牛奶数量众多,因此如何在出厂前快速检测牛奶中的环丙氨嗪已成为热门话题。传统的环丙氨嗪检测方法包括高效液相色谱法、气相色谱质谱法等,由于其步骤繁琐、检测费用高等原因不适用于现场快速检测。因此研究建立高效、快速、经济的检测方法检测环丙氨嗪具有重要的理论价值和实用意义。核酸适配体制备方法十分简易,不易降解,并且标记方法多种多样,因而本研究以核酸适配体为基础,选择不同的信号输出技术开发出了三种快速检测牛奶中环丙氨嗪的方法。基于环丙氨嗪特异性核酸适配体和荧光淬灭开发出了一种快速检测牛奶中环丙氨嗪的方法。当用FAM标记的富含G的特异性核酸适配... 

【文章来源】：上海应用技术大学上海市

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

环丙氨嗪结构式Fig1.1StructuralformulaofCyromazine

机单链序列文库，然后将靶标加入到该随机序列文库中，使靶标与随机序列文库中的序列通过氢键、范德华力和空间构象等进行相互作用，结合成较为稳定的核苷酸-靶标复合物；在第1轮筛选后，洗脱掉未与靶标结合的随机序列，留下能与靶标稳定结合的核酸序列，并以此核酸分子为模板进行PCR扩增，进行下一轮的筛选过程[85]。依照此筛选流程进行反复筛选扩增，直到得到能与靶标进行特异性结合的适配体序列。将最后得到的适配体序列进行PCR扩增并送到生物公司进行纯化和克隆测序，然后对该适配体进行解离常数测定和和特异性检验。图1.2SELEX筛选技术示意图[86]Fig1.2DiagramfortheSELEXenrichment1.3.2适配体在检测中的应用由于核酸适配体具有具有高特异性、高亲和力、制备简单、合成成本低等优点，其

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本文编号：3102487