金颗粒和磁珠构建SERS传感用于猪流行性腹泻病毒的检测研究

发布时间：2021-05-22 02:03

　　猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）是六大猪冠状病毒之一,仔猪感染致死率可高达100%。该病毒在蝙蝠等野生动物体内、在临床症状消失数周的猪栏中亦有发现,说明其传播途径广,潜伏时间长。试纸条和酶联免疫吸附（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）存在定量困难或假阳性问题。因此,开发便携、精确的PEDV检测方法,对于解决食品和环境问题十分有意义。表面增强拉曼散射（Surface enhanced Raman Scattering,SERS）具有指纹图谱、免水干扰等优点,被广泛应用于环境监测、食品安全和生物分析等领域。本研究以“三明治”夹心传感模型为基础,以生物素功能化的金纳米粒子（Bio-Au NP）和负载金纳米粒子的磁珠（Magnetic bead modified with gold nanoparticles,MB@Au NP）构建SERS信号探针,分别结合链霉亲和素-生物素（SA-Bio）放大系统和磁分离富集技术,设计了两种分别检测PEDV抗体的SERS传感平台。本文研究主要内容和结果如... 

【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：84 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词表
第一章 绪论
    1.1 PEDV的历史与危害
    1.2 PEDV的检测方法
        1.2.1 传统的PEDV检测方法
        1.2.2 近来的纳米分析方法检测PEDV
    1.3 SERS概述
        1.3.1 SERS的发展、机理和优势
        1.3.2 SERS探针
    1.4 SERS的分析检测应用
        1.4.1 SERS检测离子、分子
        1.4.2 SERS检测生物标志物
        1.4.3 SERS检测病毒
    1.5 论文设计思路和技术路线图
        1.5.1 设计思路
        1.5.2 技术路线图
第二章 金颗粒信号标签(AuNP tag)结合镀金玻片传感平台用于PEDV的检测
    2.1 前言
    2.2 主要仪器与试剂
        2.2.1 主要仪器
        2.2.2 主要试剂
    2.3 实验方法
        2.3.1 AuNP tag制备及传感平台构建
        2.3.2 AuNP tag制备过程的表征实验
        2.3.3 可行性实验
        2.3.4 条件优化实验
        2.3.5 传感器中单一器件缺失实验
        2.3.6 传感平台信号空间稳定性试验
        2.3.7 线性实验
        2.3.8 特异性实验
        2.3.9 加标回收实验
    2.4 结果与讨论
        2.4.1 AuNP tag制备过程的表征
        2.4.2 实验可行性验证
        2.4.3 实验条件优化
        2.4.4 每个传感器件对SERS强度影响
        2.4.5 信号均一性
        2.4.6 线性结果
        2.4.7 特异性结果
        2.4.8 血清样品中的Ab_1加标回收
    2.5 本章小结
第三章 磁珠信号标签(MB tag)结合玻碳电极传感平台用于PEDV的检测
    3.1 前言
    3.2 主要仪器和试剂
        3.2.1 主要仪器
        3.2.2 主要试剂
    3.3 实验方法
        3.3.1 MB tag及传感平台构建过程
        3.3.2 可行性和信标对比实验
        3.3.3 信号来源验证实验
        3.3.4 条件优化实验
        3.3.5 无探针传感平台信号的空间分布实验
        3.3.6 完整传感平台信号的空间分布实验
        3.3.7 传感平台信号随时间变化实验
        3.3.8 单个器件缺失实验
        3.3.9 线性实验
        3.3.10 特异性实验
        3.3.11 加标回收实验
    3.4 结果与讨论
        3.4.1 MB tag的表征
        3.4.2 实验可行性和优势
        3.4.3 信号来源验证
        3.4.4 条件优化
        3.4.5 GCE传感信号均一性
        3.4.6 完整GCE传感平台信号均一性
        3.4.7 传感的信号重现性
        3.4.8 单一器件缺失证明GSH等的作用
        3.4.9 线性实验结果
        3.4.10 特异性结果
        3.4.11 加标回收
    3.5 本章小结
第四章 总结及展望
    4.1 全文总结
    4.2 展望
参考文献
附录
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻病毒的免疫电镜诊断的研究[J]. 王继科,刘长明,马思奇,王明,魏凤祥,于文涛,周金法.  中国畜禽传染病. 1991(02)



本文编号：3200771