超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱快速精准测定粮食中多种真菌毒素

发布时间：2021-08-09 04:26

　　采用直接提取稀释的快速前处理方法,结合稳定同位素稀释技术,利用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱,建立了粮食中16种真菌毒素的快速精准分析方法。样品采用乙腈-水-乙酸溶液（70∶29∶1,体积比）提取,以C18色谱柱进行色谱分离,通过全扫描模式进行定量检测,并采用稳定同位素稀释以减少基质效应对定量分析的影响。结果表明,16种真菌毒素在一定浓度范围内均具有良好的线性关系,相关系数（r2）均大于0.999,4种常见粮食基质（小麦、玉米、大米、大麦）的限量浓度水平的加标回收率（n=6）为75.3%¹23.5%,相对标准偏差为0.41%¹4.7%。该方法简单、准确,适用于粮食中真菌毒素的检测,可满足日常监测工作的需要。 

【文章来源】：分析测试学报. 2017,36(04)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【部分图文】：

直接提取稀释方法与商品化的多毒素净化方法

452分析测试学报第36卷由于该净化填料对于这些毒素有一定的吸附，会导致净化过程中目标毒素的损失，影响定量结果的准确性，而直接提取稀释法由于无需净化步骤，避免了该过程中目标物的损失，对于所有目标毒素的回收率均在91%～113%之间。因此，直接提取稀释法更适合于多种真菌毒素的快检前处理，而且处理过程更加简单、快捷。图216种真菌毒素标准混合溶液的色谱图Fig.2Chromatogramof16mycotoxinsmixedstandardsolution1．NIV，2．DON，3．DON－3G，4．3-AcDON，5．15-AcDON，6．AFG2，7．AFG1，8．AFB2，9．AFB1，10．HT－2，11．FB1，12．T－2，13．ZEN，14．OTA，15．ST，16．FB22.3基质效应由于本方法前处理采用直接提取稀释法，样品中会存在一定的基质效应干扰。本实验对常见的4种粮食基质进行了考察，并以目标物在空白基质液中的峰面积与溶剂中峰面积的百分比来评估基质效应，当结果接近100%时，表明无明显的基质效应，而高于100%说明有基质增强效应，低于100%则说明有基质抑制效应。16种真菌毒素在4种常见粮食基质中的基质效应结果显示，16种真菌毒素的基质效应为61.0%～118.4%，说明在这几种常见的基质中存在一定的基质增强或抑制效应。如玉米基质中的黄曲霉毒素，基质抑制作用明显(61.0%～84.4%)。基质匹配标准曲线是一种常见的减少基质效应的方法，但是由于真菌毒素污染的普遍性，16种毒素均不含的空白基质不易获得，特别是完全匹配的基质难以获得，而代表性基质的普适性面临挑战，具有较大的不确定性，导致基质匹配定量在标准化检测中的应用受到局限。因此，为了更好消除基质效应的影响，本实验采用稳定同位素稀释法进行定量，以确保结果的准确可靠。2.4检测条件的优化对比含不同比例盐和酸的弱

分辨质谱快速精准测定粮食中多种真菌毒素455(续表5)CompoundContent(μg/kg)HＲMSQQQＲelativeaveragedeviation(%)Assignedvalue(μg/kg)Ｒange(μg/kg)HT－2102.07108.215.810659～152OTA3.123.052.22.871.61～4.13T－2138.87145.624.815187～215ZEN212.01221.504.4212126～2982.7实际样品的测定采用本方法对某地区的10份小麦样品进行检测，共检出NIV，DON，DON－3G，15-AcDON，3-Ac-DON，AFB1，AFB2，ZEN，ST9种真菌毒素，其他7种真菌毒素均未检出，结果如表6所示。部分检出毒素的定性结果如图3所示。近年来由于异常气候的原因，导致我国部分地区真菌毒素的污染较为严重，因此加强日常监测尤为重要。本方法可以适用于大量粮食样品中真菌毒素的快速准确定量分析。表610份小麦样品中真菌毒素毒素的含量Table6Contentsofmycotoxinsin10wheatsamplesw/(μg·kg－1)CompoundWheat1Wheat2Wheat3Wheat4Wheat5Wheat6Wheat7Wheat8Wheat9Wheat10NIV575.271320.571566.70511.34374.75450.02906.46615.421243.48838.08DON2120.384878.665336.741499.001586.621644.843150.092143.354214.723153.44DON－3G415.371274.221439.74264.18307.10380.44649.73554.18951.60808.193-AcDON28.3952.0154.6413.2523.8316.9221.7120.5844.3946.5915-AcDON21.3242.1544.647.9717.3011.2015.431.6935.4337.37AFB20.03NDND0.030.03NDNDNDNDNDAFB11.16NDND2.140.40NDNDNDNDNDZEN67.92168.1658.28115.6823.9117.0086.0020.5562.4124.47ST3.430.26NDNDNDND0.83NDNDND图3实际样品(A)和标准溶液(B)中黄曲霉毒素B1的二级质谱图Fig.3MS2spectraofAFB1inrealsample(A)andstandardsolution(B)3结论基于Q－Exactive高分辨质谱技

【参考文献】：
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本文编号：3331360