磁分离辅助的多重放大技术用于复杂样品中核酸的检测

发布时间：2021-09-05 12:49

　　核酸是在生命活动中扮演重要角色的一类生物大分子,其中一些短片段的核酸近年来受到了广泛关注,如细胞外游离DNA（cfDNA）、微小RNA（microRNA）等。因为这些核酸往往是疾病标志物或治疗的靶点,所以这些核酸的检测具有重要的价值。然而,由于它们往往以较低浓度存在于外泌体、血液或唾液等复杂样品中,因此其检测面临着“能否测得到”和“能否测得准”的问题。为此,本文通过磁分离来消除样品中共存组分的影响,实现待测对象的分离和富集,进而通过核酸信号放大技术提高检测灵敏度,实现了血清、细胞培养液等复杂样品中核酸的高灵敏检测,具体包括:1.基于磁珠辅助的催化发夹组装和“DD-A”FRET信号检测复杂样品中的核酸本方法设计了三条DNA发夹探针,分别是修饰在磁珠上的Capture、双标供体（FAM）的H1和单标受体（TAMRA）的H2。首先,磁珠上的Capture捕获样品中的目标物,同时Capture暴露出一段可以触发CHA的片段;接着,通过磁场的作用即可将目标物分离和富集出来;最后,磁珠被重悬于含有H1和H2的缓冲液中并引发CHA,结果形成大量的H1/H2复合物,从而观察到明显的FRET信号。然而在... 

【文章来源】：湖南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：91 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

SP探针浓度的优化

【参考文献】：
期刊论文
[1]Small nucleolar RNAs （snoRNAs） as potential non-invasive biomarkers for early cancer detection[J]. Wen-Dan Chen,Xiao-Feng Zhu.  Chinese Journal of Cancer. 2013(02)
[2]联合检测外周血hTERT mRNA及GGT mRNA-H表达对小肝癌早期诊断的价值[J]. 隋璐璐,刘小方,许政.  中国普外基础与临床杂志. 2011(01)



本文编号：3385381