基于交叉支点介导链置换的DNA荧光探针的构建及应用研究

发布时间：2021-09-25 10:17

　　荧光探针具有响应快速、灵敏高效、检测限低、成本经济等优势,被广泛应用于基因测序、早期疾病诊断、生物分析、食品检测等领域。基于支点介导的链置换技术所构建的荧光生物传感器,不仅具备上述优势,还提高了荧光探针的可编程性,有效的增强了对复杂目标的识别能力。同时,它能与核酸适配体、DNA逻辑电路和酶催化等技术良好结合,拓宽了多种生物分析物的检测识别范围。目前该机制在支点激活和调控方面还存在短板,其支点区域具有碱基序列依赖性,且支点稳定性不高,设计步骤繁琐,不利于应用范围广的荧光生物传感器的构建。针对目前问题,本论文设计了一种基于交叉支点介导DNA链置换的荧光探针,并应用在单碱基错配识别和目标寡核苷酸的识别。通过交叉支点等多种方案激活后续链置换反应,实时荧光监测和聚丙烯酰胺凝胶电泳实验表明了该方案的可行性。具体研究工作如下:（1）交叉支点的构建及DNA链置换反应的研究:我们构建了一种新型交叉支点介导链置换机理,该交叉支点是由两组DNA序列完全独立的寡核苷酸链R和T组成,激活下一步DNA链置换反应并调控链置换反应速率。对多条寡核苷酸的单碱基错配试验和支点长度影响链置换速率实验,优化了该体系的识别能力... 

【文章来源】：湘潭大学湖南省

【文章页数】：81 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

PNA杂交原理图MALDI-TOFMS实验SherryXiChen等[10]提出了一种条件性DNA荧光探针，能有效地区分双链DNA(dsDNA)中多种单碱基错配，且实现了DNA长片段中单个碱基的有效识别

图1.2双链支点交换机制的示意图

基于GO的DNA荧光传感分析示意图


本文编号：3409540