四种不同重组GH11木聚糖酶的分子改造及催化特性研究

发布时间：2021-10-09 02:42

　　木聚糖酶作为一种应用性较强的糖苷水解酶,广泛应用于食品与非食品工业生产中,为了满足应用于工业生产的要求,有关木聚糖酶性能的研究越来越广泛。本论文着重关注了四种不同重组GH11木聚糖酶N端区域的变化对其催化特性所产生的影响,主要包括以下五个部分:第一,嗜热踝节菌F1208重组GH11木聚糖酶T-Xyn的分子改造及水解特性的研究。通过N端序列FPTGNTTELEKRQTTP（1-16）→AFTVGNGQ替换及C端Phe（193）Ser替换构建突变体T-XynFM。在T-XynFM水解木三糖、木四糖和木五糖的产物中,木糖均没被检出。当水解多聚木聚糖（榉木、桦木和燕麦木聚糖）时,T-XynFM的产物中木糖生成量远低于T-Xyn,最大减少量约为90.22%（燕麦木聚糖）。T-XynFM水解木三糖的产物中出现木四糖,其生成量多于60%,表明T-XynFM具有较强的转糖苷酶活性,该活性对生产低聚木糖具有较强的吸引力。第二,娄彻氏链霉菌L10904重组GH11木聚糖酶Srxyn的分子改造及水解特性的研究。通过N端替换ATTITT（1-6）→AFTVGNGQ及“Cord”结构上的Ile（99）Thr替换... 

【文章来源】：北京工商大学北京市

【文章页数】：117 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

木聚糖酶的催化机制Fig.1.1Themechanismofxylanase（1）单置换反应机制；（2）双置换反应机制(1)Singledisplacementmechanism;(2)Doubledisplacementmechanism

图 1.2 GH11 木聚糖酶的结构示意图Fig. 1.2 The structure of GH11 xylanaseA 和 C：GH11 木聚糖酶的三维折叠结构；B：GH11 木聚糖酶的二级结构。A and C: three dimensional structure of GH11 xylanase; B: secondary structure of GH11 xylanas

4图 1.3 GH11 木聚糖酶的催化结合位点分布Fig. 1.3 The map of catalytic binding sites of GH11 xylanase1.4 木聚糖酶基因的克隆与表达随着基因工程技术的发展，越来越多的木聚糖酶基因被克隆并成功表达。HideTanaka 等从 Aureobasidium pullulans 中克隆得到木聚糖酶基因 xynI，长度为 663 b含有一个59 bp的内含子，信号肽为34个氨基酸，编码成熟肽187个氨基酸[17]。Tets

【参考文献】：
期刊论文
[1]木聚糖酶的开发与应用[J]. 慕娟,问清江,党永,李叶昕,张烁,李文柯,李慧惠.  陕西农业科学. 2012(01)
[2]嗜热酶耐热机制及提高酶热稳定性的研究进展[J]. 吴穗洁,吴文林,刘斌.  亚热带农业研究. 2006(04)
[3]中性木聚糖酶在面包制作中的应用[J]. 张勤良,王璋,许时婴.  食品与发酵工业. 2004(07)



本文编号：3425474