基于dsDNA的适配体共振光传感器检测CA125等五种生物标志物

发布时间：2021-12-12 13:31

　　共振光技术是近二十年来快速发展的一种光学检测方法,因其具有快速,灵敏的特点,被广泛用于小分子、蛋白质及病毒的检测。将适配体结合到共振光技术中,将赋予这种检测方法更好的特异性和选择性。为了实现这种高效灵敏的检测方法,本文构建了两条以适配体为基础的dsDNA并将其作为结合元件,进行了三个共振光的实验,完成了对多种生物标志物的检测,内容为:（1）适配体的dsDNA在共振光传感器中同时检测癌症标志物癌胚抗原125和应激诱导的磷蛋白1。用羧基荧光素标记的癌胚抗原125适配体和青色素5标记的应激诱导的磷蛋白1适配体与氧化石墨烯的荧光传感器说明了癌胚抗原125和应激诱导的磷蛋白1的适配体能特异性结合癌胚抗原125和应激诱导的磷蛋白1。以这两条适配体与它们的互补链组装了dsDNA,用甲基紫作用这个dsDNA得到了共振光传感器,该共振光信号在两个波长处的强度变化可以同时准确定量混合溶液中的癌胚抗原125和应激诱导的磷蛋白1的量。（2）适配体的dsDNA在共振光传感器中同时检测溶菌酶和ATP。以ATP的适配体序列和溶菌酶适配体的互补序列为DNA1,以溶菌酶的适配体序列和ATP适配体的互补序列为DNA2,将... 

【文章来源】：湘潭大学湖南省

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

适配体与蛋白质特定区域结合的三维图

.3 适配体在 RLS 传感器中的应用意义及其研究现状为了解决 RLS 技术对目标物检测的选择性难题，适配体被研究员用到检测中，这得益于适配体对目标分析物的高选择性和高亲和性。因此提出了基于适配体的共振光传感器。这种传感器继承了 RLS 的高灵敏体的高选择性，被广泛应用于目标分析物的检测，而且在检测目标分很好的选择性和很低的检出限。2011 年广西师范大学的蒋志亮等人[23]将 ATP 适配体与其互补链进行，得到双链 DNA，将分析物 ATP 加入之后，ATP 与其适配体特异性结双链 DNA，这时候互补链就是成为游离状态的单链 DNA，如图 1.2。颗粒加入体系中，在不存在分析物 ATP 时，也就不存在游离状态的A，这个时候的金纳米颗粒发生聚集形成强的 RLS 信号，而随着分析物入，游离出来的单链 DNA 可以保护部分金纳米颗粒而减少金纳米颗粒，从而减少体系的 RLS 强度，这就实现了 ATP 的定量检测。这个方 的检测具有高的灵敏性和选择性。

图 1.3 适配体的共振光传感器对前列腺癌胚抗原的检测原理图2012 年汕头大学的陈展光等人[25]将巯基修饰的单链适配体固定到金纳，利用目标物前列腺抗原 PSA 与适配体的特异性结合来引起金纳米颗，这种聚集会产生强的 RLS 信号，通过这种 RLS 信号的变化就可以成SA 的浓度（图 1.3）。该方法对 PSA 的检测限为 0.032 ng/mL,这种高的益于 RLS 光谱试验的高度灵敏性。2014 科学家将合成的双核铀酰复合物和 ATP 适配体修饰的金纳米颗粒 探针[26]，由双核铀酰复合物与 ATP 形成一个线性超分子，同时适配体纳米颗粒由于适配体与目标物的特异性结合，这样 ATP 就可以作为一梁物质，将这三者结合成一个大尺寸的颗粒，得到强的 RLS 信号，这强度变化与 ATP 的浓度成一个线性关系，其线性范围可以从 5 到 50


本文编号：3536761