一种基于质谱的靶向代谢组学方法建立及应用研究

发布时间：2022-08-13 11:37

　　本研究通过使用标准品结合三重四极杆质谱的针泵模式建立了氨基酸、肉碱、以及一些氨基代谢物的质谱检测方法。并且优化了液相色谱使用的色谱柱、流动相、梯度模式、柱温等参数,建立了最优的液相色谱分离方法。脂质靶向代谢组学使用的是液相色谱联用高分辨质谱平台。代谢物使用了脂质相关数据库并根据二级结构进行定性。并且使用了部分标准品进行验证。最终定性了 300多种脂质代谢物。液相分离方法同样进行了优化。本研究针对建立的三种靶向组学检测方法,分别选用几种生物基质中不含有的所测代谢物的同位素或是同系物进行了随机的方法学验证。主要从检测限,定量限,线性,稳定性,精密度,回收率等方面验证方法的准确性与可靠性。结果显示,线性相关系数R2均大于0.999,日间日内精密度均小于5%。稳定性、精密度、回收率等也均满足靶向代谢组学实验要求。证明所建方法灵敏度高,准确性好,可以用于靶向组学研究。为了验证所建靶向组学方法的应用性,本研究使用建立的方法进行了生物基质的代谢组学分析。选用的生物基质为正常人与代谢综合征病人的血浆。仪器采集的数据使用相关软件进行数据处理与统计学分析。结果显示,代谢物检测结果有很好的稳定性与准确性。正... 

【文章页数】：113 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 绪论
    1.1 靶向代谢组学概述
    1.2 靶向代谢组学研究平台
    1.3 靶向代谢组学研究流程
    1.4 靶向代谢组学应用
    1.5 论文的研究意义和主要内容
        1.5.1 论文研究的目的与意义
        1.5.2 论文研究的主要内容
第二章 靶向测定极性小分子代谢物方法建立
    2.1 引言
    2.2 试验设备、材料与方法
        2.2.1 实验仪器
        2.2.2 实验试剂与耗材
        2.2.3 标准品溶液的配置
        2.2.4 质谱方法的建立
        2.2.5 质谱分析方法结果与讨论
        2.2.6 液相方法的建立
        2.2.7 液相方法结果与讨论
        2.2.8 前处理方法的建立
        2.2.9 总结
    2.3 靶向测定液质系统方法学验证
        2.3.1 仪器、试剂与耗材
        2.3.2 方法学验证
        2.3.3 结果与讨论
        2.3.4 总结
第三章 靶向测定氨基代谢物方法建立
    3.1 引言
    3.2 试验设备、材料与方法
        3.2.1 实验仪器
        3.2.2 实验试剂与耗材
        3.2.3 标准品溶液的配置及衍生
        3.2.4 质谱方法的建立
        3.2.5 质谱分析方法结果与讨论
        3.2.6 液相方法的建立
        3.2.7 液相方法结果与讨论
        3.2.8 前处理方法的建立
        3.2.9 总结
    3.3 靶向测定方法学验证
        3.3.1 仪器、试剂与耗材
        3.3.2 方法学验证
        3.3.3 结果与讨论
        3.3.4 总结
第四章 靶向脂质组学方法建立
    4.1 引言
    4.2 试验设备、材料与方法
        4.2.1 实验仪器
        4.2.2 实验试剂与耗材
        4.2.3 液质检测方法的建立
        4.2.4 脂质代谢物鉴定过程
        4.2.5 质谱方法结果与讨论
        4.2.6 液相方法结果与讨论
        4.2.7 前处理方法的建立
        4.2.8 总结
    4.3 靶向脂质组学方法学验证
        4.3.1 仪器、试剂与耗材
        4.3.2 方法学验证
        4.3.3 结果与讨论
        4.3.4 总结
第五章 代谢综合征靶向代谢组学应用研究
    5.1 引言
    5.2 试验设备、材料与方法
        5.2.1 实验仪器
        5.2.2 实验试剂与耗材
        5.2.3 血浆样本前处理
        5.2.4 仪器数据采集与分析
    5.3 结果与讨论
        5.3.1 靶向测定极性小分子结果与讨论
        5.3.2 靶向测定氨基代谢物结果与讨论
        5.3.3 靶向脂质组学结果与讨论
    5.4 总结
第六章 综合结论与建议
    6.1 结论
    6.2 问题与建议
参考文献
致谢
导师与作者介绍
附件


【参考文献】：
期刊论文
[1]非靶向和靶向代谢组学在药物靶点发现中的应用[J]. 范仕成,高悦,张慧贞,黄民,毕惠嫦.  药学进展. 2017(04)
[2]代谢组学分析技术及代谢物鉴定[J]. 王超,涂文志,王穆,让蔚清.  国际药学研究杂志. 2010(05)



本文编号：3676959