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硅、磷取代近红外罗丹明合成及其性质研究

发布时间:2023-01-08 16:48
  近年来,基于新型近红外有机小分子荧光染料及探针的生物荧光成像技术受到广泛关注。研究表明,在常规罗丹明体系中引入桥连杂原子可对染料分子光学性质进行调控。相比传统罗丹明,硅基罗丹明和磷基罗丹明的最大吸收和最大发射波长均红移至近红外区,满足了近红外生物荧光成像要求。在本论文中,我们致力于设计新型硅基和磷基罗丹明染料的合成路线,并构建磷基罗丹明荧光探针PR-HOCl和PR-ONOO-,进一步通过光谱分析手段、细胞成像实验和小动物光学成像实验证实,PR-HOCl可灵敏检测生物体内HOCl,PR-ONOO-可原位在线、精确定位溶酶体。具体内容包括如下:(1)硅基和磷基罗丹明荧光染料的合成目前主要采用传统方法制备硅基罗丹明衍生物,该方法合成难度和成本均较高,为相应应用带来了巨大困难。我们设计并优化了硅基和磷基罗丹明衍生物的合成路线,对硅基罗丹明关键中间体合成条件进行优化,最终实现了产率最大化。此外,还考察了含苄苯磷基罗丹明在不同pH环境中荧光强度的变化情况。(2)基于近红外磷基罗丹明的次氯酸荧光探针构建及深度成像次氯酸(HOCl)在许多细胞调节过程中起着重... 

【文章页数】:104 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
Abstract
第一章 绪论
    1.1 前言
    1.2 新型近红外有机小分子荧光探针的作用机理及分类
        1.2.1 荧光探针的作用机理
        1.2.2 新型近红外有机小分子荧光探针
    1.3 硅、磷取代罗丹明近红外有机小分子的研究进展
        1.3.1 硅基罗丹明荧光染料的研究进展
        1.3.2 磷基罗丹明荧光染料的研究进展
    1.4 本文研究思路及内容
第二章 硅基和磷基罗丹明荧光染料的合成
    2.1 引言
    2.2 实验仪器与试剂
        2.2.1 实验仪器
        2.2.2 实验试剂
    2.3 实验过程
        2.3.1 硅基和磷基罗丹明染料的合成路线
        2.3.2 硅基罗丹明中间体的合成
        2.3.3 硅基罗丹明染料的合成
        2.3.4 磷基罗丹明染料的合成
        2.3.5 光谱学性质研究
    2.4 实验结果与讨论
        2.4.1 硅基罗丹明关键中间体条件优化
        2.4.2 光谱学性质研究
    2.5 本章小结
第三章 基于近红外磷基罗丹明的次氯酸荧光探针构建及深度成像
    3.1 引言
    3.2 实验仪器与试剂
        3.2.1 实验仪器
        3.2.2 实验试剂
    3.3 目标化合物的合成方法
        3.3.1 化合物2 的合成
        3.3.2 化合物3 的合成
        3.3.3 化合物4 的合成
        3.3.4 探针PR-HOCl的合成
    3.4 光谱学实验
        3.4.1 荧光探针PR-HOCl光谱学性质研究
        3.4.2 pH对探针PR-HOCl的影响
        3.4.3 探针PR-HOCl选择性研究
        3.4.4 探针动力学实验
    3.5 生物实验
        3.5.1 探针细胞毒性分析
        3.5.2 内源性次氯酸RAW264.7 细胞荧光成像实验
        3.5.3 外源性次氯酸RAW264.7 细胞荧光成像实验
        3.5.4 BALB/c裸鼠肝组织切片制备和染色
        3.5.5 内源性HOCl活 BALB/c裸鼠荧光成像实验
    3.6 结果与讨论
        3.6.1 探针PR-HOCl设计与合成
        3.6.2 PR-HOCl光谱性质
        3.6.3 pH对探针的影响
        3.6.4 探针PR-HOCl选择性实验研究
        3.6.5 探针PR-HOCl动力学实验
        3.6.6 外源性和内源HOCl RAW264.7 细胞荧光成像实验
        3.6.7 肝组织切片荧光成像实验
        3.6.8 炎症小鼠模型中HOCl深层荧光成像实验
    3.7 本章小结
第四章 精确定位溶酶体的近红外磷基罗丹明荧光探针
    4.1 引言
    4.2 实验仪器与试剂
        4.2.1 实验仪器
        4.2.2 实验试剂
    4.3 目标化合物的合成与表征
        4.3.1 化合物2 的合成
        4.3.2 化合物3 的合成
        4.3.3 目标化合物PR-ONOO-的合成
    4.4 光谱学实验
        4.4.1 荧光探针PR-ONOO-紫外吸收和荧光光谱性质研究
        4.4.2 pH对探针PR-ONOO-及对探针响应ONOO-的影响
        4.4.3 探针PR-ONOO-选择性研究
        4.4.4 探针动力学实验
    4.5 生物实验
        4.5.1 探针细胞毒性分析
        4.5.2 外源性ONOO-RAW264.7 细胞荧光成像实验
        4.5.3 内源性ONOO-探针PR-ONOO-亚细胞定位实验
    4.6 结果与讨论
        4.6.1 荧光探针PR-ONOO-紫外吸收和荧光光谱性质研究
        4.6.2 pH对探针PR-ONOO-及对探针响应ONOO-的影响
        4.6.3 探针PR-ONOO-选择性研究实验
        4.6.4 探针动力学实验
        4.6.5 探针细胞毒性实验
        4.6.6 外源性ONOO-RAW264.7 细胞荧光成像实验
        4.6.7 内源性ONOO-探针PR-ONOO-亚细胞定位实验
    4.7 本章小结
第五章 结论
参考文献
在攻读硕士期间取得的科研成果
致谢
附录



本文编号:3728839

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