基于质谱成像技术的抗食源性病原微生物化合物分离与鉴定

发布时间：2023-05-07 17:17

　　食源性病原微生物是全球食品安全问题的核心,环境微生物耐药性普遍上升的趋势对于食品安全中病原微生物的防控会产生极为不利的影响,加快新型抗菌物质的筛选研究工作对于保障食品安全具有重要意义。基质辅助激光解吸/电离-飞行时间质谱成像技术(MALDI-TOF IMS)能够对二维平面的分子质量进行直接分析,以无标记的方式将数百甚至数千个分析物的分布和丰度特征以可视化的图片形式呈现,为微生物代谢物中抗菌物质的研究提供了新思路。本研究利用质谱成像技术对波兰青霉拮抗尖孢镰刀菌的生物功能分子进行了分析研究,通过分子量定位追踪,从发酵液中分离到两个化合物5和6,经鉴定为fructigenine B(5)和fructigenine A(6),它们对尖孢镰刀菌的MIC₅₀分别为50-100μg/mL和15-62.5μg/mL,显示了良好的生物活性。从波兰青霉发酵液提取物中还分离得到了Methyl-hydroxy(4-hydroxyphenyl)acetate(1)、penipratynolene(2)、cyclo(Trp-Phe)(3)、aspterric acid(4)、aspterri...

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

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致谢
摘要
ABSTRACT
缩写和符号
1 文献综述
    1.1 食品安全概述
    1.2 天然生物活性成分与抗生素的筛选研究
    1.3 MALDI-TOFIMS技术
        1.3.1 MALDI-TOFIMS基本原理
        1.3.2 MALDI-TOFIMS在生物代谢物检测中的应用
    1.4 MALDI-TOFIMS在波兰青霉活性化合物筛选中的研究
    1.5 链格孢真菌与淡紫拟青霉研究背景
2 引言
    2.1 研究目的与意义
    2.2 研究技术路线
3 材料与方法
    3.1 菌种材料
    3.2 试剂材料
    3.3 仪器材料
    3.4 实验方法
        3.4.1 使用MALDI-TOFIMS技术筛选波兰青霉活性化合物操作方法
        3.4.2 真菌活化与发酵方法
        3.4.3 细菌活化与保藏方法
        3.4.4 波兰青霉发酵液提取与样品处理方法
        3.4.5 链格孢发酵液提取与样品处理方法
        3.4.6 淡紫拟青霉发酵液提取与样品处理方法
        3.4.7 化合物分离分析与结构鉴定方法
        3.4.8 对尖孢镰刀菌生物活性测试方法
        3.4.9 对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生物活性测试方法
4 结果与分析
    4.1 波兰青霉活性化合物筛选结果
        4.1.1 波兰青霉拮抗尖孢镰刀菌与质谱成像分析结果
        4.1.2 从波兰青霉分离的化合物结构鉴定
        4.1.3 生物活性测试结果
    4.2 链格孢与淡紫拟青霉发酵液粗提物分离鉴定
        4.2.1 从链格孢真菌分离得到的化合物结构鉴定
        4.2.2 从淡紫拟青霉分离得到的化合物结构鉴定
        4.2.3 化合物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌生物活性测试结果
5 讨论
6 结论
参考文献
附录
    附图A 化合物相关核磁谱图
    附图B 化合物液相色谱图
作者简介



本文编号：3810993